抑制IGF1R激活可以克服AZDR细胞中的奥希替尼/泰瑞沙耐药性

　　为了检查IGF1R的激活是否可以促进PC9 / T790M / AZDR细胞对奥希替尼（泰瑞沙）的耐药性，使用两种不同的siRNA沉默了这些细胞中IGF1R的表达。通过Western印迹和qPCR分析检测到，这两种siRNA均显着抑制了IGF1R的表达。通过使IGF1R沉默，PC9 / T790M / AZDR细胞中的细胞对奥希替尼的敏感性得以显着恢复。在H1975 / AZDR细胞中获得了相似的结果。

　　通过沉默IGF1R恢复PC9 / T790M / AZDR细胞对奥希替尼的敏感性。在PC9 / T790M / AZDR细胞中用siRNA抑制IGF1R的表达，并通过蛋白质印迹分析评估其敲低。使用了两种特异性siRNA和一种非特异性对照siRNA，并显示了来自siRNA实验的代表性数据。（b）siRNA介导的敲低后IGF1R mRNA表达的qPCR分析。用指定浓度的奥希替尼处理细胞72小时或不对其进行处理。对奥希替尼的敏感性通过WST-8测定法确定。条形图显示了奥希替尼细胞的IC50值。控制siRNA，IGF1R siRNA＃1。

　　为了研究IGF1R抑制作用是否能克服PC9 / T790M / AZDR细胞中的奥希替尼耐药性，我们使用了林斯替尼，这是一种IGF1R的小分子抑制剂。奥希替尼处理可抑制PC9 / T790M / AZDR细胞中EGFR的磷酸化，并部分抑制ERK1 / 2的磷酸化。但是，单独的奥希替尼不能抑制AKT磷酸化。治疗可抑制IGF1R的磷酸化，但AKT的磷酸化不能单独被抑制。

　　值得注意的是，奥希替尼和林斯替尼的联合治疗有效抑制了PC9 / T790M / AZDR细胞中的AKT磷酸化。此外，与奥希替尼组合使用时，使用林西替尼的治疗可显着恢复PC9 / T790M / AZDR细胞对奥希替尼的敏感性。这些发现表明，IGF1R激活与PC9 / T790M / AZDR细胞对奥希替尼的获得性耐药有关。在H1975 / AZDR细胞中获得了相似的结果。通过抑制IGF1R激活减轻PC9 / T790M / AZDR细胞中的奥希替尼耐药性。PC9 / T790M / AZDR细胞未经处理或用奥西替尼（1μmol/ L）或林斯替尼（1μmol/ L）或其组合处理3小时。对细胞裂解液进行蛋白质印迹分析，以检测总和磷酸化的EGFR（Y-1068），IGF1R，Akt，ERK1 / 2和肌动蛋白。

　　结果代表两个独立的实验。TL对每个条带进行光密度分析。条形图显示了磷酸-/总AKT和ERK1 / 2蛋白的谱带强度之比。将细胞用指定浓度的奥希替尼或奥希替尼和林西替尼（1μmol/ L）的组合处理72小时。对药物的敏感性通过WST-8测定法确定。条形图显示了奥希替尼细胞的IC50值。奥希替尼和奥希替尼+ 林西替尼。奥希替尼现在的效果还是非常的不错，如果您有需要购买仿制药版本的奥希替尼可咨询下方微信。