泰瑞莎奥西替尼在直肠癌中的作用

　　奥西替尼（泰瑞莎）是一种不可逆的EGFR / HER2抑制剂，已被发现在临床前肺癌模型中对具有EGFR基因突变的癌细胞有效。但是，奥西替尼在结直肠癌（CRC）细胞中的作用尚不清楚。在本研究中，我们研究了奥西替尼如何抑制CRC细胞的生长并增强其他化疗药物的作用。我们发现p73介导的奥西替尼诱导的p53上调了凋亡调节剂（PUMA）的表达，而与PI3K / AKT通路在CRC细胞中抑制后的p53状态无关。此外，奥西替尼诱导的细胞凋亡需要PUMA。此外，奥西替尼还与5-FU协同作用，通过PUMA诱导CRC细胞显着凋亡。

　　结肠直肠癌（CRC）是常见的恶性肿瘤，在世界上所有已诊断的癌症中，其发病率和死亡率均位居第二。目前，CRC伴随较高的死亡率是由于疾病，该疾病在晚期常常被诊断为没有可靠的生物标志物。转移性疾病是CRC患者高死亡率的主要原因。用于结直肠癌治疗的常规化疗涉及细胞毒性药物（例如5-氟尿嘧啶（5-FU），伊立替康和奥沙利铂）的组合，由于缺乏特异性，其疗效有限且副作用大。抗癌靶向疗法的使用显着提高了化学疗法对抗大肠癌的有效性。口服奥西替尼是针对酪氨酸激酶（一种ErbB家族蛋白）的不可逆抑制剂，可用于治疗EGFR突变阳性的非小细胞肺癌。但是，对奥西替尼在CRC中的作用了解甚少。

　　在本研究中，我们发现奥西替尼通过AKT / p73途径诱导PUMA上调，并且PUMA在CRC细胞对奥西替尼的治疗反应中起重要作用。我们的结果表明，PUMA水平可指示奥西替尼以及其他可能靶向药物的治疗效果。

　　为了确定奥西替尼对CRC细胞的作用，用递增浓度的奥西替尼处理HCT15和SW48细胞72小时，并通过MTS分析对增殖进行分析。根据结果，奥西替尼可有效降低这些细胞系的细胞增殖。接下来，我们研究了奥西替尼是否可诱导CRC细胞凋亡。在凋亡分析中，我们发现10μg/ mL的奥西替尼增加了HCT15细胞中膜联蛋白V阳性细胞的数量。我们的发现还表明，奥西替尼诱导HCT15细胞中the子手胱天蛋白酶3和7的激活。泛半胱天冬酶抑制剂z-VAD-fmk预处理后，还发现细胞凋亡反应减弱，提示凋亡反应是caspase依赖性的。此外，奥西替尼治疗可增加HCT15细胞中caspase 3和9的活化。上述数据表明，奥西替尼抑制CRC细胞的增殖并诱导其凋亡。

　　奥西替尼是不可逆地抑制ErbB家族酪氨酸激酶受体的第三代酪氨酸激酶抑制剂。一些临床前数据表明，肺鳞状细胞癌的病理生物学对ErbB家族通路有很强的依赖性。在这项研究中，我们调查了奥西替尼对CRC细胞的作用。我们的结果首次证明，奥西替尼的治疗作用至少部分由凋亡诱导的细胞自主过程介导，该过程由AKT抑制，p73诱导导致PUMA诱导发展并激活线粒体依赖性细胞凋亡。

　　PUMA介导的细胞凋亡事件可以被癌基因激活，并作为针对致癌信号通路的保护机制。我们的结果表明，PUMA可以在响应奥西替尼的AKT抑制后被诱导，并通过线粒体途径促进CRC细胞凋亡。PUMA的诱导在许多化学疗法的促凋亡作用中起关键作用，并且可能是化学敏感性的有用指标。在第二阶段和第三阶段大肠癌中接受基于5-FU的治疗的患者，PUMA表达增加与更好的预后相关。此外，最近的一项研究表明，肿瘤细胞中分离的线粒体对PUMA BH3肽的反应与癌症患者的化疗反应相关。目前的研究结果表明，PUMA的表达可以作为预测结肠癌细胞对奥西替尼反应的有用指标。除PUMA诱导外，在奥西替尼治疗后还调节了其他Bcl-2家族成员，并有助于凋亡诱导。尽管很难从手术后接受化学疗法治疗的大肠肿瘤中获取活组织检查结果，但仍可以使用非侵入性方法（例如分析循环肿瘤细胞）来检测PUMA诱导。

　　总之，这项研究证明了奥美替尼对人CRC细胞肿瘤发生的抑制作用与p53状态无关。随后的实验表明，奥西替尼显着增加了HCT15细胞中caspase 3和9的裂解。我们的结果表明，抑制AKT和p73诱导可能是奥西替尼诱导的PUMA表达的原因。PUMA诱导可能是测试奥西替尼的临床试验的有用生物标记，并且可能对未来的开发和应用具有重要意义。微信扫描下方二维码了解更多：