在AZD9291奥希替尼中CCDC6-RET表达细胞的增殖速率降低

　　我们试图确定在上述患者中观察到的基因融合是否足以引起获得性耐药。我们最初专注于CCDC6-RET融合基因。通过慢病毒感染PC9（EGFR del19）和MGH134细胞来产生CCDC6-RET表达细胞系。在没有EGFR抑制剂的情况下，表达CCDC6-RET的细胞与亲本细胞的生长相似。当用AZD9291奥希替尼治疗时与亲代细胞相比，PC9CCDC6-RET和MGH134CCDC6-RET细胞继续增殖，而亲代细胞的细胞活力却净下降。

　　值得注意的是，在奥希替尼中CCDC6-RET表达细胞的增殖速率降低，这表明RET激活虽然足以驱动获得性耐药，但不能完全补偿EGFR信号传导损失。检查了在患者2中观察到的新型PCBP2-BRAF融合是否是驱动阻力。我们从患者的核心针头肝活检中建立了一个细胞系（MGH845-1），并确认了PCBP2-BRAF融合基因和EGFR T790M缺失的存在。使用靶向保留在PCBP2-BRAF融合物中的BRAF编码序列的siRNA敲除MGH845-1中的BRAF，对细胞生存力有适度的影响，并进一步使细胞对奥希替尼敏感。

　　与先前检查黑色素瘤中BRAF融合的先前报道一致，MGH845-1细胞对MEK抑制剂曲美替尼敏感，但对RAF抑制剂达布拉非尼或LXH245不敏感。 临床前结果表明，结合使用EGFR和RET抑制剂可以克服CCDC6-RET赋予的耐药性，足以说明应该探讨患者的治疗方法。鉴定为获得性RET融合的首例MGH患者是一名44岁的del19 EGFR突变晚期NSCLC患者，接受一线顺铂/培美曲塞第二线阿法替尼治疗，然后对正在生长的肺部病变进行支气管镜活检，显示SFA融合了CCDC6-RET。基线组织无法进行RET测试。他每天接受150毫克的厄洛替尼联合60毫克的标签外卡波替尼治疗。

　　一个月后的扫描显示疾病稳定，但2.5个月后的扫描显示疾病进展并提示治疗中断。19他患有1级腹泻，皮疹和AST升高。 一名患有del19 EGFR突变晚期NSCLC的60岁女性接受一线阿法替尼治疗，获得T790M并接受奥希替尼治疗（18个月）。然后，她接受了胸膜活检，显示通过SFA融合了CCDC6-RET。基线组织不足以用于SFA，但RET荧光原位杂交（FISH）为阴性，表明确实获得了CCDC6-RET融合。

　　鉴于第一例患者的反应欠佳，首例患者已使用多靶点TKI卡博替尼并在以RET融合作为主要致癌驱动因素的NSCLC中成功使用选择性RET TKI BLU-667进行了成功经验，因此我们为奥希替尼编写了针对患者的研究性新药（IND）方案加上BLU-667.17，她开始使用每天80 mg的奥希替尼和每天200 mg的BLU-667，然后在治疗2周后将BLU-667增加到300 mg。在开始治疗后几天内呼吸困难得到改善。 8周后进行扫描显示，RECIST肿瘤缩小率为78％，在治疗16周后进行的随访影像学检查中证实有部分反应。该组合具有良好的耐受性，仅具有1级毒性，包括疲劳，白细胞减少症，高血压，口腔干燥症和转氨酶。在撰写本文时（治疗四个月），治疗仍在进行中。如果需要购买仿制药版奥希替尼，可添加下方微信。