NK细胞的消耗减弱了乐伐替尼/乐卫玛诱导的肿瘤生长抑制

　　如果乐伐替尼（乐卫玛）诱导的NK细胞肿瘤浸润在抗肿瘤免疫反应中起主要作用，那么NK细胞的去除应减弱lenvatinib对肿瘤生长的抑制作用。为了验证这一假设，对具有B16-F10异种移植物的C57BL / 6N小鼠进行了NK细胞耗竭抗体（克隆PK136）的预处理，随后进行了乐伐替尼治疗。在治疗过程中连续检测到血液中的NK细胞。在治疗过程中，用耗竭抗体治疗的小鼠中NK细胞几乎被完全去除。在治疗结束时，检测到肿瘤浸润的NK细胞。在接受NK细胞耗竭抗体的小鼠肿瘤组织中几乎未检测到NK细胞。更重要的是，我们发现NK细胞耗竭显着减弱了乐伐替尼。这些数据表明NK细胞可能在乐伐替尼介导的抗肿瘤作用中发挥重要作用。

　　NK细胞的耗竭会减弱乐伐替尼诱导的肿瘤生长抑制作用。A.显示小鼠治疗程序的示意图。将小鼠随机分为3组：未治疗的乐伐替尼+同种型（Len + Iso）和乐伐替尼+ PK136（Len + PK136），n =6。皮下注射B16-F10细胞后四天开始腹膜内抗体注射。 C57BL / 6N小鼠。肿瘤细胞接种后五天开始通过管饲法进行乐伐替尼治疗。在这些治疗过程中，将小鼠放血以检测NK细胞的消耗。B.在接受NK细胞消耗抗体的小鼠中连续的NK细胞消耗。

　　通过尾静脉从每只小鼠收集五十微升血液。红细胞裂解后，将细胞用抗NK1.1抗体染色并通过流式细胞仪分析进行检测。汇总数据和代表点图显示了PK136治疗后NK细胞耗竭对肿瘤的影响。将肿瘤组织加工成单细胞悬液。总共1×10用抗NK1.1抗体将6个细胞染色。通过流式细胞术分析检测NK细胞数。E.治疗结束时各组的平均肿瘤重量。每个独立实验的n = 6。重复实验两次。F. ERK和磷酸化Erk1 / 2通过蛋白质印迹检测。将B16-F10细胞用媒介物乐伐替尼（1000 nM，300 nM，100 nM）或乐伐替尼加上NK细胞耗竭抗体处理4小时。提取总蛋白。Erk1/2。重复实验三遍。结果是一致的。显示了一个独立实验的代表性结果。

　　NK细胞耗竭抗体治疗是否会干扰乐伐替尼的受体酪氨酸激酶抑制活性？为了回答这个问题，我们进行了免疫印迹分析以检测下行信号ERK和磷酸化（磷酸）ERK1 /受体酪氨酸激酶。将B16-F10细胞用媒介物乐伐替尼或乐伐替尼加NK细胞耗竭抗体（PK136，100μg/ mL）处理4小时。在体内实验中，NK细胞耗竭抗体的剂量为200μg/小鼠。100μg/ mL的浓度应高于消耗抗体的血浆浓度。乐伐替尼在1000 nM剂量下能显着抑制ERK的磷酸化，NK细胞耗竭抗体不会减弱乐伐替尼的抑制作用。因此，NK细胞耗竭抗体治疗不会干扰乐伐替尼的受体酪氨酸激酶抑制活性。这些数据进一步证明NK细胞在乐伐替尼介导的抗肿瘤作用中起重要作用。如果您有需要购买乐伐替尼仿制药，更多详情可咨询下方微信。