奥希替尼/泰瑞沙可有效地抑制细胞增殖水平

　　探索了针对Ex20Ins的活性如何转化为细胞增殖抑制。根据磷酸化数据，奥希替尼（泰瑞沙）和AZ5104显示出对H2073-FQEA，H2073-SVD和H2073-ASV细胞系相似的有效抑制增殖水平。但是，与pEGFR活性相反，奥希替尼在Ex20Ins和wtEGFR之间没有显示出相同的选择性余量，尽管这种断开的原因尚不清楚。为了将奥希替尼的数据纳入背景，吉非替尼和阿法替尼也显示出仅对临床敏感的H2073-FQEA具有高效力，这也与它们的wtEGFR活性相似。

　　然而，与奥希替尼形成重要对比的是，与wtEGFR相比，前一代TKIs对H2073-SVD和H2073-ASV细胞系的活性明显较低。 这些数据共同表明，奥希替尼及其代谢产物AZ5104可有效抑制EGFR磷酸化和在EGFR中带有Ex20Ins突变的细胞系增殖，并且与目前批准的第一代和第二代TKI相比具有更有利的突变体选择性。

　　为了探索奥希替尼及其代谢产物AZ5104的体内活性，我们对两种不同的NSCLC EGFR CRISPR设计的H2073异种移植物进行了单药治疗，这些异种移植物带有Ex20Ins SVD或Ex20Ins ASV。与临床经验一致，Ex20Ins SVD和ASV赋予原发耐药性7.5mg/kg，该剂量代表阿法替尼40mg临床起始剂量。 H2073亲本细胞系对相似剂量的阿法替尼敏感，表明耐药性是由于Ex20Ins而非细胞系背景引起的。

　　为探讨功效与靶标调控之间的关系，研究了携带H2073-SVD肿瘤的小鼠用单剂量的奥希替尼，AZ5104或阿法替尼治疗后，在和30小时后收获肿瘤。全面的EGFR通路生物标记物用于评估EGFR TKI在肿瘤组织内的影响。通过Western blot评估磷酸化EGFR抑制作用，以及通过免疫印迹评估磷酸化AKT和磷酸化ERK抑制作用，下游信号通路抑制作用证实了药效学作用。尽管在小鼠中奥希替尼和AZ5104的药代动力学半衰期仅为大约3小时，但即使在16小时的时间点后，磷酸化EGFR染色仍显着减少，这与它们的预期不可逆作用模式一致。

　　有趣的是，尽管下游信号标记在6小时后同样表现出最大的抑制作用，但与磷酸EGFR相比，它们表现出更多的瞬时抑制作用。阿法替尼给药后也有类似的观察。与奥希替尼或阿法替尼相比，AZ5104观察到的更强疗效与更深入，更短暂的EGFR和下游信号通路抑制作用相关。使用H2073-ASV观察到相似的结果。这些数据表明，奥希替尼和AZ5104均可在体内实现与肿瘤生长抑制相关的强大的Ex20Ins介导的途径抑制作用。如果您有需要购买仿制药奥希替尼，可咨询下方微信。