奥希替尼(AZD9291)的抗肿瘤活性

　　第三代EGFR抑制剂奥希替尼（AZD9291）选择性且不可逆地抑制EGFR激活和T790 M突变体，同时保留野生型EGFR。奥西替尼现已被批准用于具有激活EGFR突变的非小细胞肺癌（NSCLC）患者（一线）或已通过T790 M突变而对第一代EGFR抑制剂产生耐药性的患者（二线）。不幸的是，所有患者最终都会复发，并对奥西替尼产生耐药性。因此，必须充分了解对奥西替尼产生抗药性的生物学基础，以改善其治疗功效并克服抗药性。细胞FLICE抑制蛋白（c-FLIP）是caspase-8的截短形式，是外源性凋亡途径的关键抑制剂。

　　目前的研究表明，AZD9291主要通过激活EGFR突变，通过促进其降解来降低c-FLIP水平，并增强肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）诱导的凋亡。此外，对c-FLIP表达水平的调节在一定程度上也改变了EGFR突变NSCLC细胞经历AZD9291诱导的凋亡的敏感性，这表明c-FLIP抑制是重要的事件，有助于AZD9291对EGFR突变体的抗肿瘤活性。

　　尽管通过基因操作（例如，过表达和基因敲低）调节c-FLIP表达改变了EGFR突变型NSCLC细胞对厄洛替尼治疗的反应，但尚无报道证明EGFR-TKIs对c-FLIP的下调。目前的研究清楚地表明，AZD9291和其他EGFR-TKIs主要在敏感的EGFR突变NSCLC细胞系中降低c-FLIP（FLIPL和FLIPS形式）的水平。

　　因此，这一发现代表了EGFR-TKIs调节（即降低）具有激活EGFR突变的NSCLC细胞系中内源性c-FLIP的水平的第一个证据，表明c-FLIP调节也可能参与介导奥西替尼的治疗功效与其他针对EGFR突变NSCLC的EGFR-TKI一样。这一发现得到以下发现的支持：

　　1）AZD9291主要在AZD9291敏感的EGFR突变NSCLC细胞系中显着降低了c-FLIP水平，但在AZD9291不敏感的EGFR WT NSCLC细胞系中却没有或仅有最低限度的降低；

　　2）强制c-FLIP的过度表达部分保护了敏感的EGFR突变NSCLC细胞免于遭受AZD9291诱导的细胞凋亡；

　　3）几种对AZD9291耐药的NSCLC细胞系失去了对AZD9291诱导的c-FLIP下调的反应；

　　4）siRNA介导的基因敲低强制c-FLIP下调显着增强了AZD9291耐药细胞对AZD9291诱导的细胞凋亡的敏感性，尽管程度有限。

　　包括AZD9291在内的对EGFR-TKIs的获得性耐药性的形成仍然是临床上的主要障碍，阻止患者经历长期缓解，最终导致治疗失败。因此，临床上迫切需要有效克服获得性抵抗的策略。我们目前的发现以及先前的研究表明，抑制c-FLIP可能是增强AZD9291抗NSCLC疗效的有效策略，并获得对该药的耐药性。因此有必要对此进行进一步研究。

　　众所周知，包括FLIPL和FLIPS在内的c-FLIP是不稳定的蛋白质，需要通过泛素化/蛋白酶体介导的蛋白质降解进行调节。许多药物通过增强蛋白质降解来降低c-FLIP水平。在这项研究中，奥希替尼可促进c-FLIP降解速率，如CHX追踪测定法所证实。此外，蛋白酶体抑制剂MG132的存在可以挽救AZD9291。一致的是，AZD9291不会降低c-FLIP mRNA水平。因此，AZD9291通过增强c-FLIP蛋白酶体降解来降低EGFR突变NSCLC细胞中的c-FLIP水平。微信扫描下方二维码了解更多：