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奥希替尼/泰瑞沙抑制GBM细胞增殖

时间:2020-12-09 14:54 来源:康安途 作者:康安途海外就医

  采用细胞计数kit-8(CCK8)实验评价第三代EGFR抑制剂奥希替尼(泰瑞沙)对6个GBM细胞系生长的影响。我们的研究结果表明,奥希替尼(泰瑞沙)显著抑制六GBM细胞系的生长表现出剂量依赖性抑制作用,IC50值从1.25到3.0μΜ。  

  与先前的报道一致,我们的研究表明,第一代的IC50表皮生长因子受体抑制剂高于10μΜ,和奥希替尼(泰瑞沙)在GBM细胞生长的抑制活性是10倍高于第一代的表皮生长因子受体抑制剂。这些结果提示奥希替尼(泰瑞沙)可能是治疗GBM的EGFR靶向药物,可能比第一代EGFR抑制剂有更好的治疗效果。  

奥希替尼,泰瑞沙

  为了进一步研究奥希替尼(泰瑞沙)是否会因脱靶效应而抑制GBM细胞生长,我们构建了两株稳定表达野生型EGFR和Cys797突变型EGFR的U87细胞系。EGFR催化区域的Cys797残留对奥希替尼(泰瑞沙)的抑制作用至关重要。我们的数据显示,奥希替尼(泰瑞沙)处理显著抑制了表达野生型EGFR的细胞的生长。而在表达Cys797突变型EGFR的细胞中,奥希替尼(泰瑞沙)对胶质瘤细胞生长的抑制作用几乎消失。  

  为验证奥希替尼(泰瑞沙)对GBM细胞增殖的抑制作用,用奥希替尼(泰瑞沙)处理U87和U251GBM细胞。然后用EdU测定细胞增殖。1e-h,1e-h,奥希替尼(泰瑞沙)处理组的U87和U251GBM细胞计数明显低于对照组。EdU-positiveU87细胞的百分比和U251GBM细胞系后2μΜ奥希替尼(泰瑞沙)治疗减少了37.37%和25.59。提示奥希替尼(泰瑞沙)对GBM细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性。  

  为了观察奥希替尼(泰瑞沙)对GBM细胞周期的长期抑制作用,我们采用菌落形成实验来评价奥希替尼(泰瑞沙)对U87和U251GBM细胞系形成菌落能力的影响。奥希替尼(泰瑞沙)显著抑制了这些GBM细胞系的集落形成。与对照组相比,殖民地形成于U87细胞的数量在2μΜ奥希替尼(泰瑞沙)治疗显著降低,67.82%。  

  在U251细胞中也观察到类似的结果。随后,我们使用甲基纤维素菌落测定法来测定有无奥希替尼(泰瑞沙)预处理的GBM细胞株培养菌落的能力。我们发现奥希替尼(泰瑞沙)处理显著降低了U87和U251细胞的菌落数量和大小。  

  综上所述,奥希替尼(泰瑞沙)显著抑制了GBM细胞形成集落的能力。为了探讨奥希替尼(泰瑞沙)抑制GBM细胞增殖的机制,本研究采用流式细胞术分析其细胞周期分布。  

  奥希替尼(泰瑞沙)处理后,U87和U251GBM细胞系细胞周期进展均阻滞在G1期。与未处理细胞相比,奥希替尼(泰瑞沙)处理后G1期细胞数量显著增加,S期和G2期细胞数量相应减少。这些结果表明奥希替尼(泰瑞沙)诱导的GBM细胞增殖减少是由于细胞周期阻滞在G1期。详情请扫码咨询:

奥希替尼,泰瑞沙


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(责任编辑:康安途海外就医)

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