奥希替尼/泰瑞沙和EGF-816对单独的EGFR激活突变具有疗效

　　目前，在临床环境中有四种EGFR–TKI：吉非替尼，厄洛替尼，阿法替尼和奥希替尼。吉非替尼和厄洛替尼是所谓的第一代EGFR–TKI，已被证明对于具有EGFR突变的NSCLC有效。阿法替尼是不可逆转地靶向pan-HER信号通路的第二代EGFR-TKI。 奥希替尼（泰瑞沙）和EGF-816是与EGFR共价结合的第三代EGFR-TKI，可有效抵抗T790M突变的EGFR，这是获得第一代EGFR-TKI耐药性的最常见机制。除临床试验外，尚无法获得EGF-816。所有类别的EGFR–TKI都仅对EGFR激活突变具有活性。

　　因此，我们评估了引入Ba/F3细胞的EGFR-TKI耐药突变对临床相关的EGFR-TKIs吉非替尼，阿法替尼，奥希替尼的敏感性和EGF-816。 如前所述，CellTiter-Glo分析显示吉非替尼和阿法替尼对EGFR激活突变有效，并且对第二代和第三代EGFR-TKIs的共价结合位点C797S也有效。但是，它们不再有效对抗T790MGatekeeper突变，T790M Gatekeeper突变是对第一代EGFR-TKIs耐药的最相关机制。

　　奥希替尼和EGF-816不仅对单独的EGFR激活突变具有疗效，而且在体外对T790M的双重突变也具有有效性。尽管已经证明第三代EGFR-TKI可以克服T790M突变引起的耐药性，但是当C797S突变与T790M顺式同时发生时，它们会失去抑制活性。表达三突变型EGFR的Ba / F3细胞完全抵抗所有世代的EGFR-TKI，IC50值与亲代Ba/F3细胞相似。

　　我们检查了PC9细胞和抗性PC9细胞（T790M；带有T790M的双突变del19，三突变；通过将C797S/T790M/del19突变EGFR引入）产生的敏感性–TKI以确认Ba/F3电池中展示的特性。 CellTiter-Glo分析在PC9三突变细胞中也显示出相似的结果，并且对所有EGFR-TKIs都具有耐药性，如Ba/F3细胞所示。有趣的是，PC9三突变细胞对吉非替尼和奥希替尼的联合治疗没有敏感性，被证明可以克服反式C797S和T790M突变介导的获得性奥希替尼耐药性。这些结果表明，没有临床有益的药物可用于治疗三突变表皮生长因子受体。

　　为了研究可以克服三突变EGFR的候选人，我们进行了集中药物筛选，以使用CellTiter-Glo分析法检查其对Ba/F3细胞中每种类型的EGFR-del19突变的功效。集中药物筛选中使用的30种药物不仅包括EGFR-TKI，而且还包括靶向其他酪氨酸激酶或丝氨酸/苏氨酸激酶的激酶抑制剂，这些激酶现在已经在临床上可用或正在临床试验中进行评估，请参考Duong-Ly等的报告。 Al.44等人的研究表明，有可能重新利用针对疾病相关或耐药性突变激酶的抑制剂。在TKI中，只有布加替尼和ponatinib被认为对EGFR-triple-del19具有抑制活性，在100 nM时具有约50％的生长抑制作用。

　　然而，通过CellTiter-Glo分析评估的ponatinib对抗三重del19的效力令人失望，其IC50值与亲代Ba/F3细胞几乎相同。然后，我们使用CellTiter-Glo分析法评估了布加替尼在T790M / del19和三联del19突变的EGFR表达Ba/F3细胞中的疗效，并与其他临床上可用的EGFR-TKIs进行了比较。该测定表明只有布加替尼抑制了表达三重del19突变的Ba/F3细胞的生长，IC50低（<100 <nM）。 IL-3作为原始生存信号通路激活剂的添加抵消了布加替尼的这种抑制作用。蛋白质印迹法证实了布加替尼在三联蛋白del19中的效力，与阿法替尼和奥希替尼缺乏EGFR磷酸化的抑制作用相比，EGFR的磷酸化及其下游信号传导途径呈剂量依赖性降低。

　　尽管布加替尼在单独表达EGFR-del19，T790M/del19或C797S/del19的Ba/F3细胞中也显示出可接受的抑制细胞生长的抑制活性和EGFR信号途径，但其功效仅优于奥希替尼对C797S / del19的功效结果表明，在表达由L858R（单独为L858R，T790M / L858R，C797S/L858R和C797S/T790M / L858R激活的突变型EGFR的Ba/F3细胞中，细胞生长抑制测定和蛋白质印迹法使用相同的EGFR–TKI设置布加替尼在EGFR-L858R系列中也有效，但效果不如del19，在表达由del19激活的EGFR相应突变类型的Ba / F3细胞中观察到相似的功效模式。现在奥希替尼的仿制药价格是多少？更多详情可咨询下方微信。