奥希替尼9291显著抑制MDA-MB-453细胞的迁移和侵袭

　　之前的研究强调了EZH2-EED相互作用对PRC2复合物完整性的重要性，因此奥希替尼(9291)在癌细胞中对EZH2-EED复合物的解离进行了探索。将弥漫大b细胞淋巴瘤细胞株(DLBCL)U2932、DB和BC细胞株MDA-MB-453、T47D暴露于奥希替尼(9291)或酶促抑制剂EPZ-6438中72h。　　

　　正如预期的那样，奥希替尼(9291)剂量依赖性地降低了所有BC和DLBCL细胞系中EZH2、EED、SUZ12和H3K27me3的水平。而竞争SAM的EPZ-6438仅抑制H3K27甲基化，对EZH2、EED和SUZ12的表达无影响。另外，组蛋白H3的甲基化修饰不受奥希替尼(9291)和EPZ-6438的影响，这突出了奥希替尼(9291)对PRC2抑制的特异性。　　

　　为了更好地了解奥希替尼(9291)的细胞效应，我们选取了几个报道的PRC2靶基因进行qRT-PCR验证。奥希替尼(9291)诱导的基因表达变化与EPZ-6438诱导的BC和淋巴瘤细胞系相似。这些数据强烈表明奥希替尼(9291)抑制了PRC2复合物的活性。　　

　　然后对奥希替尼(9291)的抗肿瘤活性进行了研究。在微摩尔浓度(0.015-19.6mol/l)下，奥希替尼(9291)抑制了携带突变型EZH2或野生型EZH2的BC细胞和淋巴瘤细胞的增殖。我们还发现，经过长时间的处理，奥希替尼(9291)降低了BC细胞的菌落形成数量。然后我们检测了奥希替尼(9291)对BC细胞MDA-MB-453和T47D、淋巴瘤细胞U2932和DB的细胞周期分布和凋亡率的影响。　　

　　与对照组相比，奥希替尼(9291)处理后细胞数量在G0/G1期有一定的积累，但对凋亡率无明显影响。EZH2已被明确证实与肿瘤的侵袭和转移有关。为了确定奥希替尼(9291)是否抑制细胞迁移，我们进行了伤口愈合实验和transwell迁移实验。奥希替尼(9291)显著抑制MDA-MB-453细胞的迁移和侵袭。　　

　　考虑到奥希替尼(9291)是一种EGFR抑制剂，我们进一步研究了奥希替尼(9291)对PRC2稳定性的影响是否依赖于EGFR的表达。我们发现，通过特异性siRNA(siEGFR)去除EGFR并不影响EZH2的表达。此外，奥希替尼(9291)仍然降低了egfr缺失MDA-MB-453细胞中EZH2和H3K27me3的表达。同时，当EGF因子提前激活EGFR通路时，奥希替尼(9291)也降低了EZH2的表达。这些数据表明奥希替尼(9291)降低了EZH2蛋白水平，抑制了PRC2活性，与EGFR的表达无关。详情请扫码咨询：