探索泰瑞沙/奥希替尼耐药靶点

　　背景：　　

　　奥希替尼是第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂，可有效延长EGFR突变(特别是T790M突变)的非小细胞肺癌(NSCLC)患者的生存率；然而，对奥希替尼获得性耐药是不可避免的，因此探索耐药靶点迫在眉睫。　　

　　方法：　　

　　考虑到环状rna(circRNAs)在癌症中的重要作用，我们建立了奥希替尼耐药的NSCLC细胞系(H1975/AZDR和HCC827/AZDR)，并使用微阵列分析来确定细胞的circRNA表达谱。逐渐增加药物浓度诱导H1975/AZDR和HCC827/AZDR细胞系。从H1975、HCC827、H1975/AZDR和HCC827/AZDR细胞中获得CircRNA芯片表达谱，通过定量逆转录PCR验证。表达数据进行生物信息学分析。　　

　　结果：　　

　　成功建立H1975/AZDR和HCC827/AZDR细胞系。H1975/AZDR和HCC827/AZDR细胞的半最大抑制浓度和侵袭能力显著增强。H1975/AZDR和HCC827/AZDR的增殖率远低于H1975和HCC827。芯片分析鉴定了15504个circrna在H1975、HCC827、H1975/AZDR和HCC827/AZDR细胞中差异表达。其中，7966上调，7538下调超过两倍。我们预测了顶层失调环状rna中可能的miRNAs。　　

　　结论：　　

　　我们的结果表明环状rna可能在NSCLC奥希替尼耐药中发挥作用，可能是一种有前景的基因治疗分子候选靶点。　　

　　肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因。非小细胞肺癌(Non-smallcelllungcancer，NSCLC)是最常见的肺癌类型之一，约占所有病例的80%。目前NSCLC的治疗主要有手术切除、化疗、放疗、靶向分子治疗和生物免疫治疗。其中，EGFR靶向治疗非小细胞肺癌的作用日益突出，并已成为世界范围内的研究热点。　　

　　奥希替尼是治疗晚期NSCLC的第三代EGFR‐酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，对EGFR突变(外显子18，19，21)和EGFRT790M突变有明显的影响，这常出现在获得性EGFR‐TKI耐药的NSCLC患者中。奥希替尼有效延长了晚期NSCLC患者的生存期，但获得性耐药是不可避免的。最近，在奥希替尼‐耐药的NSCLC患者中检测到EGFRC797S突变，其发生率为17-20%。　　

　　虽然第四代EGFR‐TKIs治疗EGFRC797S突变的研究已经开展，但奥希替尼耐药的复杂机制尚未确定，因此第三代EGFR‐TKI(奥希替尼)耐药的问题仍然存在。因此，确定奥希替尼‐耐药患者基因治疗的更多分子靶点是至关重要的。　　

　　环状RNA(CircRNAs)是一类新的内源性非编码RNA(ncRNAs)，主要由上游外显子5'端和下游外显子3'端RNA剪接而成。最初，环状rna被认为是剪接错误或基因重排的副产物，但越来越多的研究证明环状rna可能在多种人类肿瘤中发挥重要作用。目前，环状RNA被认为是RNA家族中最有前途的新恒星之一。专家已经证实环状RNA可以与microRNAs(miRNA)相互作用，并发挥海绵的作用，通过环状RNA‐miRNA‐信使RNA(mRNA)途径阻止miRNA调节基因表达。　　

　　CircRNAs稳定、组织特异性强，是内源性竞争性rna(ceRNAs)，因此更适合作为肿瘤生物标志物，为靶向分子治疗提供了新的思路。circrna如circ_ITCH、circ_0013958、circ_10087615等已被发现，并被证实与肺癌的发生、发展、肿瘤淋巴结转移(TNM)分期、病理分级、淋巴结转移密切相关。　　

　　目前环状rna在肿瘤耐药机制中的研究十分有限；相关报道仅在吉西他滨耐药的胰腺导管腺癌和化疗药物耐药的肺、乳腺和结肠癌细胞中发现。到目前为止，还没有研究调查NSCLC中circRNA谱与获得性第三代EGFR‐TKIs耐药性之间的关系。　　

　　考虑到circRNA在癌症中的重要作用，我们推测circRNA水平的变化可能与NSCLC中奥希替尼耐药相关。我们旨在分析非小细胞肺癌耐药机制，屏幕circRNAs相关耐药性，并提供一个实验模型，克服肿瘤耐药性为了寻找新的分子靶点抗奥希替尼(泰瑞沙)检测非小细胞肺癌患者的治疗提供了一个坚实的基础和有针对性的药物治疗肺癌的有效工具。详情请扫码咨询：