奥希替尼/泰瑞沙与其他药物的不同治疗效果

　　为了评估布加替尼是否通过ATP竞争作用于EGFR，并比较其三突变EGFR和野生型EGFR之间的活性，使用ADP-Glo试剂盒进行了体外激酶测定。该测定法证明的激酶活性抑制曲线随三突变体和野生型EGFR中的ATP浓度变化而变化，表明布加替尼竞争性地影响EGFR激酶域的ATP结合位点。通过计算10μMATP的IC50值证实了布加替尼对三突变EGFR的更高效力，对于三重L858R，其IC50值比野生型低约10倍。

　　此外，与每种药物的IC50值相比，布加替尼对无EGFR突变的细胞株显示的抑制活性要比阿法替尼和奥希替尼（泰瑞沙）小，尤其是在野生型EGFR扩增的A431细胞中。在KRAS突变的A549或H460细胞中，所有这些抑制剂均具有较高的IC50值。从这些结果来看，与阿法替尼甚至奥希替尼相比，布加替尼有望具有与野生型EGFR抑制相关的更好的毒性谱。

　　由于布加替尼被开发为下一代间变性淋巴瘤。激酶（ALK）–TKI45,46，然后我们研究了几种具有相似结构的ALK–TKI——AP26113类似物，AZD3463，TAE684，赛立替尼和ASP3026。使用CellTiter-Glo分析的细胞生长抑制实验表明，布加替尼和AP26113类似物对三重突变具有相似的效力，IC50值小于100nM，而AZD3463具有中等活性，其次是TAE684和其他两种没有活性的药物。

　　在蛋白质印迹实验中再现了这些药物在细胞生长抑制方面功效的差异，结果表明布加替尼和AP26113-analog更有效地抑制了表达所有类型EGFR突变的细胞中EGFR的磷酸化及其下游信号传导途径。这些实验还表明，L858R对抑制剂的敏感性往往不如del19。 ALK-TKIs化学结构的比较表明，某些官能团在增加与三突变EGFR的结合亲和力中起关键作用。首先，布加替尼和AP26113-analog中的氧化膦基团，而不是TAE684，色瑞替尼和ASP3026中的异丙基磺酰基基团可能有助于它们对抗三突变EGFR的更大活性。其次，在色瑞替尼中存在异丙氧基而在其他ALK-TKI中不存在甲氧基，而ASP3026中不存在氯化物可能是不利因素。我们进行了计算机对接模拟和分子动力学模拟来评估布加替尼与三联L858R突变EGFR之间的结合相容性，并阐明布加替尼对抗三联突变EGFR的功效是否取决于ATP结合位点的靶向性。

　　在我们的模拟中，布加替尼装在EGFR三联体L858R的ATP结合口袋中，而没有在空间上拥挤T790M或C797S，与M793的骨架酰胺形成两个氢键。此外，对接复合物模型中的配体结合构象与结合到TAE684（PDB-ID：2XB7）的EML4-ALK的晶体结构中的构象非常相似。该发现被认为是合理的，因为这两种抑制剂的蛋白质和化学结构都高度相似。尽管这些结构分析表明推测这两种抑制剂以相似的方向与EGFR结合，但对三突变型EGFR的活性在细胞生长抑制或蛋白质印迹方面却明显不同。为了解释抑制活性的差异，对接模型提示了布加替尼中有利于EGFR结合的亚结构。

　　在对接的EGFR–布加替尼模型中，氧化膦基团完全占据了ATP结合位点的三磷酸结合空间，同时该组中所有原子的静电或范德华相互作用能得到了有意义的增加，提示与EGFR的特异性相互作用。在TAE684的情况下，其被异丙基磺酰基取代可能会干扰分子间的相互作用模式，并解释了本研究显示的布加替尼优于TAE684的三重突变。 布加替尼和三突变型EGFR之间的相互作用图谱表明，组分B和E对亲和力的贡献比其他区室少，并且适合结构修饰。现在奥希替尼的仿制药价格是多少？更多详情可咨询下方微信。