尼达尼布(Ofev)对纤维细胞功能的影响

　　尼达尼布（Ofev）是一种酪氨酸激酶抑制剂，对血小板衍生生长因子受体 (PDGFR)、成纤维细胞生长因子受体 (FGFR) 和血管内皮生长因子受体 (VEGFR) 具有特异性，最近已被批准用于特发性肺纤维化。纤维细胞是骨髓来源的祖细胞，可产生生长因子并促进肺纤维化。然而，尼达尼布对纤维细胞功能的影响仍不清楚。

　　方法

　　从健康志愿者的外周血中分离出人类单核细胞。使用ELISA和Western印迹分析纤维细胞中生长因子及其受体的表达。尼达尼布对纤维细胞刺激肺成纤维细胞的能力的影响在它们的增殖方面进行了检查。还评估了尼达尼布对纤维细胞分化和迁移的直接影响。我们研究了尼达尼布是否影响了博莱霉素处理的小鼠肺中纤维细胞的积累。

　　结果

　　人纤维细胞产生 PDGF、FGF2 和 VEGF-A。尼达尼布和每种生长因子受体的特异性抑制剂显着抑制由纤维细胞上清液刺激的肺成纤维细胞的增殖。尼达尼布在体外抑制生长因子诱导的纤维细胞的迁移和分化。博莱霉素诱导的肺纤维化模型中的纤维细胞数量因尼达尼布的给药而减少，这与抗纤维化作用有关。

　　结论

　　这些结果支持纤维细胞作为生长因子的生产者和响应者的作用，并表明尼达尼布（Ofev）的抗纤维化作用至少部分是由抑制纤维细胞功能介导的。

　　血小板衍生生长因子 (PDGF)、成纤维细胞生长因子 (FGF) 1/2 和血管内皮生长因子 (VEGF) 与肺纤维化的发病机制有关。尼达尼布是一种酪氨酸激酶抑制剂，也对 PDGFRα 和 β、FGFR1、2 和 3 以及 VEGFR1、2 和 3 具有特异性。在两项 III 期临床试验（INPULSIS 1 和 2）中，与安慰剂相比，使用尼达尼布治疗一年后，特发性肺纤维化 (IPF) 患者用力肺活量的年下降率降低。然而，尼达尼布调节肺纤维化的机制尚未完全探索。几项研究报告了 BIBF 1000和尼达尼布 (BIBF1120)的抗纤维化作用。然而，尼达尼布的主要靶点PDGFR、FGFR和VEGFR的作用尚未详细分析。

　　尼达尼布（Ofev）是一种酪氨酸激酶抑制剂，最近在世界主要地区被批准用于治疗 IPF 患者。然而，尼达尼布减轻肺纤维化的机制尚未完全阐明。在本研究中，我们检查了尼达尼布对纤维细胞的影响，以提高对尼达尼布抗纤维化作用的理解。尼达尼布在体外抑制纤维细胞的迁移和分化。纤维细胞刺激成纤维细胞增殖的活性也被尼达尼布阻断。此外，尼达尼布治疗显着减少了 BLM 诱导的小鼠肺纤维化模型肺中纤维细胞的积累。

　　尼达尼布是一种有效的酪氨酸激酶抑制剂，针对FGFR，PDGFR，VEGFR。在本研究中，我们使用免疫印迹分析显示纤维细胞表达 FGFR2 和 VEGFR1。我们之前使用 qPCR 和流式细胞术分析证明了 PDGFRα 和 β 的表达；然而，在本研究中，通过免疫印迹分析检测 PDGFRα 和 β 是不够的。这可能是由于用于检测 PDGFR 表达的方法，因为 PDGF 蛋白可能会刺激纤维细胞的迁移。我们还显示成纤维细胞表达 FGFR2 和 PDGFRα 和 β。因此，纤维细胞和成纤维细胞可能是尼达尼布的推定治疗靶细胞。

　　我们还研究了尼达尼布对单核细胞分化成纤维细胞的影响。在本研究中，不仅尼达尼布观察到了抑制作用，而且 FGFR、PDGFR 和 VEGFR 的特异性抑制剂也观察到了抑制作用。我们还证明了包括 PDGF、FGF 和 VEGF 在内的几种生长因子刺激了纤维细胞的分化。据报道，纤维细胞的分化被纤维化细胞因子如白细胞介素 (IL)-4 和 IL-13 以及 PDGF 增强。然而，尚未研究纤维细胞分化与 FGF/FGFR 或 VEGF/VEGFR 信号通路之间的关系。已显示单核细胞表达 FGFR、PDGFR和 VEGFR，但是在本研究中，通过对单核细胞的免疫印迹没有清楚地检测到生长因子受体。因此，这些生长因子可能在肺纤维化中的纤维细胞分化中起作用。

　　我们发现尼达尼布（Ofev）抑制了纤维细胞的迁移。在我们之前的研究中，发现 PDGF/PDGFR 轴在体外和体内纤维细胞迁移到纤维化肺中发挥作用。此外，我们证明 FGF 和 VEGF 是本研究中纤维细胞的有效化学引诱剂。因此，尼达尼布被认为通过直接抑制纤维细胞的分化和迁移来预防肺纤维化。然而，尼达尼布不能抑制由 FGF2 刺激的纤维细胞的迁移。如上所述，认为这是因为 IC50尼达尼布对 FGFR 的价值很高。尼达尼布在体外实验中的作用也在体内实验中得到证实。尼达尼布的给药显着减少了用 BLM 治疗诱导肺纤维化的小鼠肺组织中的纤维细胞数量。

　　这项研究的局限性在于，在我们的模型中，很难检查尼达尼布（Ofev）对纤维化阶段纤维细胞诱导的影响。因为在小鼠博来霉素诱导的肺纤维化模型中，诱导到肺的纤维细胞数量从第 7 天开始增加，但在第 21 天急剧减少，如之前的报告所示。因此，为了规避这个问题，对 nintedanib 患者肺组织的分析可能会提供更多信息，以了解未来研究中对纤维细胞募集的影响。微信扫描下方二维码了解更多：