阿西替尼(axitinib)作为癌症患者的有前途的治疗剂

　　Wnt (wingless)/β-catenin 信号通路是癌症治疗的一个有吸引力的靶点。然而，已知的Wnt抑制剂离临床应用还很远。在这里，我们报告临床批准的药物阿西替尼（axitinib）在体外和体内强烈抑制 Wnt/β-catenin 信号传导。特别是，在阿西替尼治疗的癌细胞中揭示了一种称为“Wnt 不对称”的 Wnt 抑制表型。E3 泛素连接酶 SHHPH（SNF2、组蛋白接头、PHD 和含环指结构域的解旋酶）作为功能靶点的鉴定意味着阿西替尼对 Wnt 信号的阻断与癌症患者中经常观察到的基因突变无关。总的来说，我们的结果表明了核 β-catenin 调节的机制，并强调了 axitinib 作为具有异常 Wnt/β-catenin 信号传导的癌症患者的有前途的治疗剂。

　　在主要癌症类型中经常观察到 Wnt（无翼）/β-连环蛋白通路的致癌突变。然而，到目前为止，还没有靶向 Wnt/β-catenin 信号的治疗剂可用于临床。在这里，我们证明了临床批准的药物 axitinib 显着阻断了癌细胞、斑马鱼和Apcmin/+ 中的Wnt/β-catenin 信号传导老鼠。值得注意的是，阿西替尼通过独立于 GSK3β（糖原合酶激酶 3β）/APC（腺瘤性息肉病大肠杆菌）复合物促进核 β-连环蛋白降解，显着诱导癌细胞中的 Wnt 不对称和非随机 DNA 分离。使用与 2D-DIGE（凝胶电泳中的 2D 差异）和质谱联用的 DARTS（药物亲和反应靶稳定性）测定，我们鉴定了 E3 泛素连接酶 SHHPH（SNF2、组蛋白接头、PHD 和环指结构域） helicase) 作为 axitinib 阻断 Wnt/β-catenin 信号传导的直接靶点。axitinib 治疗可稳定 SHHPH，从而增加 β-catenin 的泛素化和降解。

　　阿西替尼（Axitinib）是一种上市的 VEGFR 抑制剂，用于治疗肾细胞癌。在这项研究中，我们在体外和体内证明了独立于 VEGFRs 的阿西替尼对 Wnt/β-连环蛋白信号传导的强烈抑制，表明阿西替尼的临床应用可能会扩展到在肿瘤活检中具有异常核 β-连环蛋白积累的癌症患者.SHHPH 作为阿西替尼阻断 Wnt 信号传导的功能靶点的鉴定以及新报道的靶标 BCR-ABL1的鉴定强烈支持这样一种观点，即虽然药物旨在具有选择性，但许多有效药物与多个分子结合，而不是与多个分子结合。与单一目标相比，这种多药理学可能在治疗上是必不可少的。值得注意的是，另一种阿西替尼结合蛋白 MED23 也与 Wnt 信号传导有关。SW480 细胞中 MED23 的 shRNA 敲低会降低 TOPFlash 活性，但不会降低 β-连环蛋白水平，表明 Wnt 抑制的另一种机制。

　　尽管在培养细胞中抑制 Wnt 信号传导和直接 ACD 所需的浓度远高于批准（即纳摩尔）对阿西替尼主要靶标的效力，但我们没有观察到阿西替尼在 5 μM（浓度Wnt 抑制所需）在 Wnt 灭活的 EPT1 和 RKO 细胞中。在鱼胚胎中，较短的体长和较细的尾巴可以通过抑制 Wnt 信号来解释。在成年鱼（13 周）中，用 axitinib（5 μM）处理 6 天后没有观察到明显的缺陷或形态变化。在ApcMin/+小鼠中，阿西替尼以与 ED70剂量（30 mg/kg，每天两次）相当的剂量（50 mg⋅kg-1⋅d-1）抑制肠腺瘤生长并降低 β-连环蛋白在小鼠中抑制 VEGFR2 所需的。出于治疗目的，重要的是在临床使用的剂量下评估患者样本中的 Wnt 抑制。另一方面，较高浓度的阿西替尼可能靶向更多蛋白质；因此，有必要系统地检查其他结合蛋白在阿西替尼介导的 Wnt 抑制和 ACD 中的作用。

　　本研究中一个有趣的观察结果是，小分子通过促进 SW480 细胞中 β-连环蛋白的更新来诱导 ACD。除了在细胞粘附和Wnt信号其良好定义的角色，β连环蛋白也是在微管阵列组织，双相性有丝分裂纺锤体的建立，和有丝分裂和细胞分裂。推测 β-连环蛋白的减少会改变其在纺锤体方向的行为并因此导致 ACD 是合理的。阿西替尼（axitinib）作为 ACD 诱导剂的独特优势可能是对称分裂的细胞比不对称分裂的细胞更容易受到阿西替尼的影响。微信扫描下方二维码了解更多：