吉非替尼(Gefitinib)是ZAP-70+CLL患者的可行治疗选择

　　慢性淋巴细胞白血病 (CLL) 可根据预后不良的生物标志物分为几组。CLL 细胞中酪氨酸激酶 ZAP-70（Syk 酪氨酸激酶家族的成员）的表达与 CLL 患者的总生存期较短有关。目前，缺乏针对 CLL 细胞中表达 ZAP-70 的患者的靶向治疗。酪氨酸激酶抑制剂吉非替尼（Gefitinib）已被证明可通过抑制 Syk 有效诱导急性髓性白血病的细胞凋亡。在这项研究中，我们试图测试吉非替尼在原代人 ZAP-70+ CLL 细胞中的功效。我们证明吉非替尼优先诱导表达 ZAP-70 的 CLL 细胞中的细胞死亡，中值 IC50为 4.5 μM. 此外，吉非替尼会降低 ZAP-70+ Jurkat T 白血病细胞的活力，但不会影响 CLL 患者的 T 细胞。蛋白质印迹分析显示，吉非替尼降低了 ZAP-70+ CLL 细胞中 Syk/ZAP-70、ERK 和 Akt 的基础和 B 细胞受体 (BCR) 刺激的磷酸化。此外，吉非替尼抑制 BCR 刺激的促生存反应并降低促生存蛋白，如 Mcl-1。最后，ZAP-70 表达使 Raji 细胞对吉非替尼治疗敏感。这些结果表明吉非替尼特异性靶向 ZAP-70+ CLL 细胞并抑制导致细胞凋亡的 BCR 细胞存活途径。这代表了酪氨酸激酶抑制剂成为 ZAP-70+ CLL 细胞有效靶向治疗的可能性。

　　慢性淋巴细胞白血病 (CLL) 的临床病程变化很大，虽然一些患者在诊断时接受治疗，但其他患者可能多年不需要治疗。生物标志物可以帮助将这些患者分为惰性和侵袭性疾病类别。CLL 的侵袭性取决于白血病细胞是否具有（60% 的 CLL 群体）或缺乏（40% 的 CLL 群体）重链免疫球蛋白可变区(IgVH)突变。因此，具有未突变IgVH(Un-IgVH) 的早期疾病患者的中位生存期为 8 年，如果患有突变IgVH(Mu-IgVH) 则为 24 年。IgVH) 疾病。IgVH突变状态的替代标记是 zeta 链相关蛋白 70 (ZAP-70) 的表达；IgVH突变的 CLL 细胞通常为 ZAP-70 阴性，而IgVH 未突变的细胞更通常为 ZAP-70 阳性。CLL 中的 ZAP-70 染色不是全有或全无的现象，为了最大限度地提高与IgVH突变状态的相关性，ZAP-70 阳性病例定义为≥20% 的 CLL 细胞染色为 ZAP-70 .像IgVH状态，CLL 细胞中 ZAP-70 的过表达与侵袭性疾病有关；ZAP-70+ 患者的治疗时间为 2.6 年，而 ZAP-70- 患者的治疗时间为 8 年，与 Rai 分期无关。因此，ZAP-70 是 CLL 治疗的合理目标。

　　尽管 ZAP-70 在 CLL 中的临床相关性众所周知，但其分子功能却鲜为人知。ZAP-70 是蛋白酪氨酸激酶 Syk 家族的成员，通常参与 T 细胞中 T 细胞受体的信号转导。ZAP-70 在恶性 B 细胞（如 CLL 细胞）中的过度表达增强了 B 细胞受体 (BCR) 通路。该通路是 CLL 细胞存活的关键机制。BCR 激活后，酪氨酸激酶 Lyn 磷酸化并激活 Syk，导致下游信号通路的激活和抗凋亡蛋白（如 Mcl-1）的上调。具有 Un-IgVH 的CLL 细胞和高ZAP-70的表达显示出增加的如Akt和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK），和NF-的BCR的下游蛋白的活化κB.这表明在BCR通过增加信号传导途径的改变那酪氨酸激酶 ZAP-70 的表达在 CLL 疾病进展中很重要。

　　吉非替尼（Gefitinib）是一种酪氨酸激酶抑制剂，以靶向表皮生长因子受体 (EGFR) 着称，用于治疗非小细胞肺癌和其他上皮来源的癌症。该药物耐受性良好，皮疹和腹泻是唯一的剂量限制性毒性。对白血病重要的是，它不是骨髓抑制性的。除了对 EGFR 活性的影响外，吉非替尼还对超过 20 种其他激酶靶标显示出活性，包括 Lyn 和 Syk。吉非替尼已显示出对急性髓性白血病 (AML)、骨髓增生异常综合征 (MDS) 和急性淋巴细胞白血病 (ALL) 的活性，在体外诱导分化和细胞死亡。这些作用与 Syk 磷酸化的抑制有关。因此，虽然吉非替尼通过抑制 EGFR 来治疗肺癌，但它在治疗包括 ZAP-70 在内的 Syk 家族成员高表达的 CLL 患者中具有潜在的效用。

　　在这项研究中，我们表明吉非替尼（Gefitinib）在未刺激和 BCR 激活时选择性诱导表达 ZAP-70 的 CLL 细胞凋亡。在这两种情况下，这些影响都与整体酪氨酸磷酸化的减少和 Lyn/Lck、Syk/ZAP-70、ERK1/2 和 Akt 磷酸化的特定减少有关。这些变化会降低 Mcl-1 的表达并阻断抗凋亡信号。通过慢病毒感染在 Raji B 细胞系中强制过度表达 ZAP-70 增加了细胞对吉非替尼诱导的细胞凋亡的敏感性。然而，来自 CLL 患者的正常 T 细胞也表达 ZAP-70，不受吉非替尼的影响。这些结果表明，吉非替尼等酪氨酸激酶抑制剂是 ZAP-70+ CLL 患者的可行治疗选择。微信扫描下方二维码了解更多：