达拉非尼Dabrafenib耐药细胞都重新激活了MAPK信号

　　黑色素瘤生物学知识的进步导致了所谓“靶向疗法”的发展，如针对B-RAFV600E和MEK蛋白的达拉非尼和曲美替尼。然而，由于激活其他生长控制途径而产生的耐药性仍然是使用此类化合物治疗黑色素瘤的关键问题，尽管新兴的计算建模概念在预测治疗反应方面取得了进展。　　

　　在目前的研究中，我们观察到三种不同的黑素瘤细胞系，所有来自MM患者和携带B-RAFV600E突变，包含一些细胞能够增殖在治疗dabrafenib (B-RAFi)，表明黑素瘤细胞的存在能够摆脱药物效应和黑色素瘤的发展负责。我们发现，所有达拉非尼耐药细胞都重新激活了MAPK信号，与药物敏感的对应细胞相比，它们表现出更长的形状，伪足形成和细胞间空隙增加。　　

　　值得注意的是，这些形态学变化伴随着间质标志物CD90的表达增加，上皮标志物E-cadherin的表达降低，这表明达拉非尼耐药黑色素瘤细胞的间质特征。在耐药细胞核周位点检测到波形蛋白，而在对药物敏感的黑素瘤细胞胞浆中观察到波形蛋白，进一步支持了这一发现。此外，所有达拉非尼耐药黑素瘤细胞比达拉非尼敏感细胞表现出更高的细胞运动性，表明这些细胞存在上皮-间充质表型转变。　　

　　然而，没有检测到E-cadherin的下调，这被认为是一种真正的经典EMT诱导剂，这表明黑素瘤细胞经历了上皮-间充质样转变或病理EMT。TGF-β1诱导的EMT与达拉非尼耐药性无关，进一步证实了这一发现。

　　此外，通过离子激流技术序列分析表明缺乏差异之间的主要癌症基因突变模式药敏结核病和耐药的黑色素瘤细胞，表明研究癌基因和肿瘤抑制基因的基因改变没有参与观察耐药细胞的表型变化。　　

　　在过去的十年中，发展中的EMT过程被认为在促进肿瘤侵袭转移和诱导耐药中发挥关键和复杂的作用。有报道称，参与EMT激活的基因，如Wnt、Oct4、EGF和Nanog，在表现出干细胞特性的细胞中表达，EMT在乳腺癌的癌症干细胞(CSC)生成中发挥关键作用。我们研究了Oct4、CD20、CD133和CD44干细胞标记物的表达。　　

　　Oct4是调控核心转录因子，参与间充质干细胞的干细胞性维持。CD20与黑色素瘤CSCs相关，而CD133作为黑色素瘤干细胞标志物的不一致数据已被报道，而CD44未被发现与黑色素瘤干细胞相关。我们发现达拉非尼耐药和敏感细胞的干细胞标记特征不同，这可以反映细胞来源的背景或微环境。值得注意的是，Oct4在耐药细胞核周和细胞核内均有表达，而在对药物敏感的黑素瘤细胞胞浆中也有表达。　　

　　我们的结论是，黑色素瘤对dabrafenib的耐药性与MAPK信号的重新激活有关，伴随上皮-间质样表型转变，以及干细胞样表型特征的获得，这可能有助于解释细胞在药物条件下继续增殖的能力。　　

　　这些数据支持了病理EMT的概念，以及EMT过程与CSCs生成相联系的概念。了解与这种EMT样或病理EMT相关的分子信号已经成为提供有效靶点药物的关键，对成功的黑色素瘤治疗策略至关重要。因此，这个细胞亚群的更详细的分子特征可能对调节这种细胞程序以达到治疗目的至关重要。详情请扫码咨询：