乐伐替尼/仑伐替尼与索拉非尼抑制ATC细胞的肿瘤生长

　　接下来，我们检查了乐伐替尼（仑伐替尼）和索拉非尼在模拟脑转移模型中的功效。在这项研究中测试的6条ATC系中，只有OCUT-1C接种到SHO小鼠的脑实质中时会诱发脑损伤。因此，我们选择了OCUT-1C细胞并建立了用于体内成像的EGFP-Eluc转染的OCUT-1C / Eluc细胞系。OCUT-1C和OCUT-1C / Eluc细胞显示相似的生长速率和敏感性乐伐替尼和索拉非尼在体外。

　　在将大脑中的OCUT-1C / Eluc细胞接种到SHO小鼠后，最早在第10天就在大脑中检测到了生物发光。随后将这些小鼠随机分为三组，每组分别用媒介物乐伐替尼（10 mg / kg）治疗）或索拉非尼（50 mg / kg）；选择这些浓度是因为它们在治疗开始后第21天或第27天在皮下肿瘤模型中的抗肿瘤作用没有显着差异。用10 mg / kg的乐伐替尼治疗可明显减少脑转移瘤的生长。相反，与皮下肿瘤模型不同，以50 mg / kg的索拉非尼治疗无法抑制OCUT-1C / Eluc细胞诱导的脑肿瘤的生长。乐伐替尼或索拉非尼的治疗对小鼠体重的影响最小。

　　乐伐替尼和索拉非尼对模拟OCUT-1C / Eluc细胞的脑转移模型的影响。将AGFP-Eluc转染的OCUT-1C（OCUT-1C / Eluc）细胞注射到SHO小鼠的大脑中。十天后，将小鼠随机分组，并通过每日一次口服管饲法用赋形剂（对照），乐伐替尼（10 mg / kg）或索拉非尼治疗。从第1天到第34天，每周两次评估生物发光。代表合并的生物发光图像和小鼠照片。

　　第34天，代表图像显示H＆E染色以及OCUT-1C诱发的脑肿瘤的Ki67和CD31免疫染色。显示的脑肿瘤中增殖细胞的定量，由观察到的Ki-67阳性细胞百分比确定。中所示的脑肿瘤中的肿瘤相关内皮细胞（CD31）的定量，确定为CD31阳性血管的数目。所示数据代表五个区域的平均值±SD。P<0.05。代表性图像显示了在用或未用乐伐替尼（10 mg / kg）或索拉非尼（50 mg / kg）治疗3天的小鼠中OCUT-1C细胞诱导的脑肿瘤CD31免疫染色。虚线表示肿瘤边缘。线的左侧是肿瘤，右侧是非肿瘤病变。黑条，100μm。

　　为了阐明乐伐替尼和索拉非尼在体内抗肿瘤作用的潜在机制，通过IHC皮下肿瘤染色评估了肿瘤细胞的增殖和微血管密度。与对照组相比，乐伐替尼和索拉非尼的治疗显着减少了Ki-67阳性增殖性肿瘤细胞的数量和微血管密度。我们使用蛋白质印迹分析进一步检查了皮下肿瘤中细胞周期和凋亡标记的表达。尽管通过乐伐替尼或索拉非尼治疗抑制了细胞周期蛋白A的表达，但裂解的PARP的表达没有改变。这些结果表明，乐伐替尼和索拉非尼均通过抑制血管生成和诱导细胞周期停滞，而不是通过诱导肿瘤细胞凋亡来抑制ATC细胞产生的皮下肿瘤的生长。对于乐伐替尼如果需要了解更多，更多详情可咨询下方微信。