乐伐替尼（乐卫玛）治疗患有脑转移的甲状腺癌患者以及乐伐替尼和索拉非尼对人间变性甲状腺癌细胞的体外作用。六种人类ATC细胞系OCUT-1C，以每孔2×103个细胞的密度接种在96孔平板中，孵育24小时。用指定浓度的索拉非尼或乐伐替尼处理培养物72小时。用MTT溶液测量细胞生长。裂解六种人ATC细胞系和HMVEC，并通过蛋白质印迹法检测指示的蛋白质。
乐伐替尼治疗了一名患有晚期甲状腺乳头状癌的脑转移的70岁男性。在治疗期间，该患者大约每3个月接受一次脑部CT检查。5毫米切片厚度的平面或对比增强的脑部CT轴向视图显示，在使用乐伐替尼治疗之前，右额叶中存在肿瘤和水肿。乐伐替尼的治疗导致了超过4个月的肿瘤缩小和肿瘤周围水肿消退。该研究是根据赫尔辛基宣言进行的。该患者参加了金泽大学批准的研究机构审查委员会，并提供了书面知情同意书。
使用MTT [3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四唑]染料还原法测量细胞活力。将以2×103个细胞的密度铺板的肿瘤细胞在96孔平板或方形板上的每孔100μLRPMI1640加10％FBS中孵育24小时。将索拉非尼或乐伐替尼添加到每个孔中，并继续孵育另外72小时。使用MTT溶液（2mg /mL； Sigma）测量细胞生长。
通过SDS-PAGE（Bio-Rad）分离蛋白质等分试样（20μg），并转移到聚偏二氟乙烯膜（Bio-Rad）上。将膜洗涤3次，并与封闭的一种封闭剂在室温下孵育1小时。洗涤后，将膜与抗PDGFRα（D13C6），磷酸-PDGFRα（Y762），FGFR（D814），磷酸-FGFR1（Y653 / 654），VEGFR2，磷酸-FRS2α（Y436）的一抗在4°C孵育过夜，FRS2α（Y436），裂解的PARP，细胞周期蛋白A2（BF683），β-肌动蛋白和细胞周期蛋白A（H432；圣克鲁斯生物技术）。将膜洗涤，并在室温下与物种特异性辣根过氧化物酶偶联的二抗孵育1小时。使用增强的化学发光底物观察免疫反应带。所有数据代表三个独立实验。
将细胞（2×105）在2 mL含10％FBS的RPMI1640中培养24小时，用PBS洗涤，并在含10％FBS的RPMI1640中孵育48小时。收获培养基并离心，并将上清液保存在-80℃直至分析。根据制造商的说明，通过Quantikine ELISA试剂盒（R＆D Systems）测量培养基中指示的细胞因子。所有样品均重复三次。用分光光度计读板器测量450nm处的颜色强度。对于乐伐替尼如果需要了解更多，更多详情可咨询下方微信。
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