阿司匹林/泰瑞沙可以延缓奥希替尼的耐药

　　在既往未治疗且EGFR突变的晚期NSCLC患者中，接受奥希替尼的患者总生存期长于接受吉非替尼或厄洛替尼的患者(38.6个月vs31.8个月)。不幸的是，获得性对奥希替尼的耐药是不可避免的，潜在的获得性奥希替尼耐药分子机制仍未完全阐明，对奥希替尼耐药的治疗策略也有限。以前的研究使用第一代EGFR‐TKI与奥希替尼联合，如果C797S和T790M突变发生在cis，并使用crizotinib与奥希替尼ifMET扩增。MEK/BRAF-V600E抑制剂联合治疗是克服奥希替尼耐药的另一种治疗策略。这些前期研究表明，联合用药可能是克服奥西替尼耐药的一种非常有效的方法。在本研究中，我们发现阿司匹林在非小细胞肺癌细胞系中克服了对奥希替尼的耐药，阿司匹林联合奥希替尼可显著降低体内非小细胞肺癌肿瘤异种移植物的生长，延长这些肿瘤小鼠的生存时间。因此，阿司匹林可能是临床上克服奥希替尼耐药的一种可行药物。　　

　　自从临床报告表明非甾体抗炎药能降低结肠癌、肝细胞癌和其他癌症的风险和死亡率以来，人们对阿司匹林作为一种潜在的抗癌药物产生了广泛的兴趣。进一步的证据表明，阿司匹林对多种肿瘤细胞具有显著的抗肿瘤特性，包括肺癌细胞和小鼠模型。此前的研究表明，阿司匹林联合厄洛替尼可增强厄洛替尼杀伤EGFR突变的NSCLC细胞的作用，以及在异种移植模型中，阿司匹林与索拉非尼和其他药物联合使用显著抑制肿瘤生长和延长缓解时间。我们目前的研究同样表明，与阿司匹林联合治疗可以克服奥希替尼的耐药性。此外，我们观察到阿司匹林可以克服对另一种第三代EGFR‐TKI、rociletinib和第一代EGFR‐TKIs吉非替尼和厄洛替尼的耐药性，这在另一篇论文中报道。总之，我们的结果和其他研究的结果表明，阿司匹林联合奥希替尼是克服奥希替尼耐药和提高NSCLC患者生存期的一种有前途的新策略。　　

　　阿司匹林克服奥希替尼耐药的具体分子机制尚未完全阐明。细胞凋亡减少与耐药性的发展相关；在目前的研究中，奥希替尼诱导EGFR突变的NSCLC细胞系凋亡，但在奥希替尼耐药的NSCLC细胞中没有诱导凋亡。这些发现与之前的研究结果一致。此外，凋亡诱导已被证明可增强TKIs和化疗药物在抑制肿瘤细胞生长方面的有效性。我们目前的研究结果清楚地表明，诱导细胞凋亡是克服奥希替尼耐药的一种可行策略。Bim，BCL‐2蛋白家族的一员，是细胞凋亡的关键调节剂。我们发现阿司匹林增加了奥希替尼耐药NSCLC细胞的Bim水平；此外，当Bim的表达被BimsiRNA敲除时，阿司匹林和奥希替尼的协同作用也大大降低。因此，阿司匹林通过诱导细胞凋亡克服奥希替尼耐药的能力可能是通过增加Bim表达介导的。　　

　　关于阿司匹林的机制调节Bim在耐奥希替尼检测非小细胞肺癌细胞中表达，先前的研究报告，Bim感应是两个量转化后的结果修改和转录诱导，这取决于一种蛋白激酶和Erk信号通路。最近的一项研究报道，转录因子FoxO3a调节Bim在多种刺激下的表达。FoxO3a还可以直接激活Bim基因，破坏线粒体完整性，释放细胞色素c，促进caspase-3等凋亡蛋白的激活，诱导肿瘤细胞凋亡。在目前的研究中，我们观察到去磷酸化的FoxO3a进入细胞核，在那里它直接与Bim基因启动子中保守的FoxO‐结合元件结合，诱导细胞凋亡。　　

　　在阿司匹林治疗后，FoxO3a和Bim蛋白的基础水平(已经很高)以及BimmRNA显著升高，这一升高与诱导奥希替尼耐药NSCLC细胞凋亡有关。此外，先前的证据表明磷酸化Akt或Erk可磷酸化FoxO3a并阻断FoxO3a核入口。我们证明，通过去磷酸化FoxO3a和提高Bim水平，Akt磷酸化抑制可以诱导PC-9GROR和H1975-OR细胞系凋亡(从而克服奥希替尼耐药)；然而，阿司匹林对Erk磷酸化的抑制作用仅在PC‐9GROR细胞中观察到，而在H1975‐OR细胞中未观察到。这些结果表明，阿司匹林介导的PC‐9GROR和H1975‐OR细胞Bim表达的增加并不是Erk‐依赖性的，这一结果与Sun等人报道的结果不同。这一发现提示Akt/FoxO3a信号通路等其他常见机制可能参与阿司匹林的作用。　　

　　因此，我们推测阿司匹林通过抑制Akt/FoxO3a信号元件的磷酸化，促进FoxO3a向细胞核转移，从而增加Bim表达，诱导肿瘤细胞凋亡。此外，对45例对第一代EGFR-TKIs获得性耐药的NSCLC患者进行了回顾性分析，这些患者接受奥希替尼作为二线治疗。这一分析结果也表明阿司匹林可以延缓奥希替尼的耐药。有趣的是，阿司匹林的抗肿瘤作用与PGE2降低密切相关。因此，为了探讨阿司匹林介导奥希替尼耐药的可能途径，我们采用ELISA试剂盒观察奥希替尼亲本细胞和耐药细胞中PGE2的分泌情况。遗憾的是，奥希替尼（泰瑞沙）耐药细胞株和亲本细胞株之间的PGE2水平没有显著差异。　　

　　在此，我们首次描述了奥希替尼和阿司匹林联合治疗对奥希替尼耐药患者的有益作用，目前的体内外实验数据支持并解释了这一结论。基于之前的研究，阿司匹林的剂量，这是由口腔填喂法，用于体内研究(20mg·公斤−1·天−1)对应于一个剂量的60mg·m−2人，相当于一个临床剂量100毫克的平均身体表面积或大约一片服用阿司匹林为了减少心血管疾病的风险因素在50公斤应承担的人类。在体外研究中使用的剂量的阿司匹林(200μ摩尔·L−1)是按照IC25在非小细胞肺癌细胞中观察到在这项研究中，远低于用于大多数报告。详情请扫码咨询：