奥希替尼/泰瑞沙耐药的潜在机制

　　基于血浆扩增子的NGS是一种相对较新的技术，而ddPCR现在已被牢固地用于基于ctDNA的生物标志物检测。我们的研究表明，与ddPCR相比，基于扩增子的血浆NGS检测EGFR‐激活突变和耐药突变具有高灵敏度和定量一致性。　　

　　这两种方法对于使用ctDNA的特定设置都很有吸引力。与NGS相比，ddPCR被认为具有较高的敏感性，仅为0.001%。此外，它有一个更简单的设置过程，更快的周转时间，不需要复杂的信息支持分析。然而，只有已知的基因变化可以被检测到，并且对几个生物标志物进行多重检测的潜力是有限的。相比之下，NGS可以识别所筛选的整个靶区中的任何基因变化，包括新的突变。同时检测许多遗传区域是NGS的常见做法。　

　　然而，NGS更费时，成本更高，需要更复杂的信息支持来进行数据分析。最近的一项研究表明，基于扩增子的NGS技术也可用于检测敏感性和特异性高的非小细胞肺癌患者ctDNA中的染色体重排和融合基因。　　

　　我们的研究增加了目前对获得性奥希替尼耐药的潜在机制的认识。在我们的患者队列中，我们使用血浆NGS9检测了之前报道的BRAFV600E和PIK3CA，以及可能的与耐药性相关的变化。我们没有检测到其他二级EGFR突变，如C797和L792或C‐MET扩增，据报道，26%和14%的病例中分别存在这些突变，这可能与样本量有关。　　

　　4例患者在奥希替尼耐药时发生了获得性TP53突变，患者3的等位基因频率高达24%。TP53突变在人类癌症中很常见，其产物是一种多功能蛋白，调节细胞周期检查点、凋亡和DNA修复等多个生理过程。目前，p53突变体在奥希替尼耐药中的作用及机制尚不清楚。在之前的三阴性乳腺癌研究中，p53突变体可能与EGFR和整合素在细胞膜上的核内循环有关，导致癌细胞的提前侵袭能力增强。我们需要进行12项功能研究来澄清TP53突变是否确实改变了EGFR水平，或者它是否在奥希替尼诱导细胞死亡中起到了关键的促凋亡作用，这意味着突变可能导致NSCLC中奥希替尼耐药。　　

　　有趣的是，在疾病进展时，使用肺图NGS没有发现EGFRS768I和L861Q激活突变的两名患者出现新的潜在耐药突变，而且这两名患者在治疗后3个月内均表现出对奥希替尼的耐药。合并数据分析显示，这些突变预测对第二代EGFR‐TKIafatinib的反应，但这些突变是否预测对奥希替尼的敏感性目前尚不清楚。如果这些突变是导致对奥希替尼主要耐药的原因，通过功能性体外试验澄清这一点将是很重要的，这将指导未来对这些不常见的EGFR突变患者的治疗决定。　　

　　本探索性研究的主要局限性是纳入的患者人数少。需要更大规模的研究来验证这项研究的结果。尽管数量较少，但本研究进一步证明了NGS和ddPCR在检测肺癌患者EGFR致敏和耐药突变方面具有很高的一致性和准确性。这项研究还表明，几乎所有对奥希替尼产生获得性耐药的患者的血浆中都能检测到新的突变。我们承认本研究中的患者是异质性的，患者的临床特征(如种族、吸烟状况和在服用奥希替尼之前的治疗)可能会影响治疗结果和获得性奥希替尼耐药模式。　　

　　先前的meta分析显示，缺失19外显子的患者、从不吸烟的患者和女性患者使用EGFR‐TKI治疗效果更好。14也有初步数据表明，在一线设置中使用奥希替尼（泰瑞沙）与在二线或更远处设置奥希替尼时获得的电阻模式不同。亚组分析(例如，亚洲人与高加索人；不能在本小型研究中进行，而应在更大规模的研究中进行调查，以根据不同的临床特征研究获得性奥希替尼耐药模式的差异。尽管如此，这组异质性的患者代表了在悉尼西南部一家大三级医院中EGFR突变的NSCLC患者的真实世界人口统计，该医院包含了多民族人口。　　

　　这项小型研究也强调了一个最重要的问题，即商业上可用的NGS是否已经准备好融入常规临床实践。对耐药突变进行表征的主要优势之一是，当目前的治疗失败时，它有可能为患者提供新的治疗选择，包括临床参与。我们承认，在世界不同地区获得毒品的情况不同；然而，我们的研究中发现的一些突变，包括BRAFV600E，目前在临床实践中有针对性的治疗方法。　　

　　相反，对于4例获得性TP53突变的患者，虽然目前还没有靶向治疗方法，但了解这种异常的存在可能有助于参与潜在的临床试验。临床治疗模式将会随着对p53生物学更完整的理解和如何优化异常的p53功能的研究而继续发展。此外，了解TP53突变状态可能有助于在未来对患者进行风险分层，并可能有助于选择类似于TP53缺失的慢性淋巴细胞白血病的治疗方法。大型前瞻性研究的长期随访结果(包括用于治疗选择的NGS分子谱)将指导临床医生确定NGS在实体肿瘤治疗中的临床应用。详情请扫码咨询：