抗丙肝抗体特异的抗原被包被在磁珠上。将样品添加到含有涂有抗原的磁珠的溶液中可以捕获抗丙肝抗体。然后用标记有异鲁米诺的示踪抗体检测捕获的抗HCV抗体。在由过氧化物酶催化的酶促反应中,底物被转换成发射光子的反应产物,然后使用检测器检测发射的光子。 CIA方法通过检测抗HCV抗体成功应用于筛查HCV感染的患者。全自动CIA分析显示出高精度,高可靠性,周转时间短,并且由于具有全自动性而在技术上很简单。目前,各种商业化的CIA自动检测方法可用于临床实验室中的抗丙肝抗体的检测。这些测定法由于其自动化程度和高灵敏度而取代了传统的EIA,尤其是在大量临床实验室中。
评估了用于增强抗丙肝抗体检测的全自动,增强CIA分析的性能,发现灵敏度和特异性分别为98.9%和97.2%。唐等。报道了系统评价和荟萃分析,以评估基于EIA的检测方法的诊断准确性。评估了基于CIA技术的HISCL抗HCV检测方法,发现该检测方法对于检测临床样品中的HCV感染分别显示98.97%和100%的敏感性和特异性。 丙肝核心抗原可在窗口期期间通过自动CIA检测到临床样品中。因此,开发用于检测HCV抗原的高灵敏度CIA方法对于在感染早期鉴定HCV至关重要。关于使用CIA检测HCV抗原以鉴定患有HCV感染者的研究报道有限。
用自动CIA检测人血清和血浆中的HCV核心抗原,显示99.9%的特异性和敏感性。 报道了用于定量测定HCV核心抗原的微粒CIA,并通过检测5403个样本发现了99.8%的特异性。报道了HCV核心抗原CIA测定结果与HCVRNA检测结果的比较。他们在治疗前和治疗后第12周样本中发现HCV核心抗原和HCV RNA的一致性为99.5%和99.24%。
测试的抗HCV阳性HCV RNA阴性样品的特异性为100%。刘等。使用对苯酚衍生物4-苯酚(4-TRP)作为CIA中鲁米诺-过氧化氢(H2O2)-辣根过氧化物酶(HRP)的有效增强剂HCV核心抗原检测系统。他们的方法显示HCV核心抗原浓度在0.6–3.6 pg / mL范围内具有良好的线性关系。没有使用CIA方法检测多种HCV抗原的报道。 快速免疫测定的定义是具有以下特征的那些:(i)直到结果少于30分钟的周转时间;(ii)不需要遵循1988年临床实验室改进修正案的中等复杂的测定,以及(iii)不需要专门设备的分析。
大多数快速免疫分析(RIA)分析适用于即时医疗点设置,它们是手动的一次性设备。目前使用的RIA设计是乳胶凝集,免疫过滤(流通),免疫色谱法(侧向流动)和光学免疫测定(OIA)。凝集和免疫过滤测定将在本文中进行简要介绍,而侧向流动测定将在单独的部分中进行描述。 RIA测试用于检测与核心,NS3,NS4和NS5区以及病毒抗原相关的抗HCV抗体。 RIA适合基础设施和实验室专业知识有限的地方。 基于凝集(AGL)的方法使用涂有分析物特异性捕获抗体的颗粒。测试样品中的分析物触发了肉眼可见的聚集体的形成。缺乏敏感性和特异性是基于凝集的测定法的主要缺点。
由于它们的快速特性,低成本和最少的试剂需求,它们被广泛使用。据报道基于凝集的RIA仅用于检测抗体。 免疫过滤(IMF)分析法,通常称为流通免疫分析法,旨在检测抗HCV抗体。抗HCV抗体特异的抗原固定在多孔免疫过滤膜上。当样品施加到膜上时,它穿过膜,并且样品中的抗HCV抗体与固定的抗原结合。然后用抗HCV抗体特异性免疫球蛋白G检测捕获的抗体,该抗体被设计为在该区域产生不同的颜色。报道了旨在检测抗HCV抗体的RIA。与EIA相比,RIA的敏感性和特异性分别为99.3%和99.0%。评估了RIA在临床样本中的表现
通过ELISA,这些样品中约有15.74%呈HCV血清阳性,而通过巢式RT-PCR呈RNA阳性的占11.02%。因此,他们的研究结果表明,不能仅仅依靠RIA作为筛查HCV的绝对诊断工具。 Mikawa等。报道了一种用于检测HCV核心抗原的快速一步免疫色谱分析方法。对于这种方法,他们在大肠杆菌的HCV核心抗原中表达了带有谷胱甘肽S-转移酶(GST)的重组融合蛋白。通过用HCV阳性血清的免疫学检测证实了正确蛋白质的表达。这种方法能够检测0.25-12.0μg的重组蛋白。那么丙肝得了该怎么办,现在一般都是推荐服用吉三代药物治疗,治愈率可达94%以上,如果您有需要购买吉三代仿制药,可以添加下方微信。
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