奥拉帕尼要一直吃多久才能治好

　　奥拉帕尼（利普卓）是时下非常好的治疗乳腺癌，前列腺癌的药物，但是很多人会有些疑问，奥拉帕尼要一直吃多久才能治好？这个是根据个人情况，因人而已的，一般一个疗程在两个月，最长不超过六个疗程，所以如果患者们吃一两个月效果没有提现的非常好，患者们可以不必担心。当然现在国家版本的奥拉帕尼价格还是非常的昂贵，如果您有需要购买更加便宜的版本，可以添加下方那个微信，我们会提供售卖。

　　将细胞在六孔板中进行，步骤如下：除去培养基，并将板用HBSS洗涤2次。 加入1 mLβ-半乳糖苷酶固定液，室温下固定15分钟。去除细胞固定液；将该板用HBSS洗涤3次在每个孔中加入1 mL染色液（10μLβ-半乳糖苷酶染色液A，10μLβ-半乳糖苷酶染色液B，930μLβ-半乳糖苷酶染色液C和50μLX-Gal溶液）并孵育在37°C下过夜； 第二天，在倒置显微镜下观察板。细胞质中均匀的蓝色细颗粒呈阳性β-半乳糖苷酶，即衰老。 SA-β-Gal染色阳性率的计算方法是：在200倍目镜下从每个孔中随机选择5个视野，计算阳性细胞的百分比作为总细胞数的百分比。蛋白酶抑制剂，裂解后提取细胞的总蛋白。

　　10％的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，将蛋白质转移到聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上。转移后，用5％脱脂奶粉的TBST将PVDF膜封闭1小时，然后用一抗（1：1,000）进行探测，并在4°C下孵育过夜。用TBST将膜清洗3次后，添加相关的抗兔或抗小鼠二抗（1：1,000）在室温下反应2小时。在成像之前，将膜用TBST洗涤3次。使用Image-J图像分析系统分析蛋白质印迹的结果，目标蛋白与GAPDH的灰度之比表示目标蛋白的相对含量。使用TRIzol试剂遵循制造商的说明。使用在Bio-Rad CFX96实时PCR系统上进行定量RT-PCR。

　　我们使用了专为检测趋化因子CXC基序配体转化生长因子。所有p值均与对照组比较。进行熔解曲线以确保产物均匀，然后使用2-ΔΔCt方法进行数据分析。从上海SLAC实验动物有限公司（中国上海）获得十只裸鼠。并在受控条件下置于无病原体的环境中。给小鼠皮下注射3×106 SKOV3细胞。当肿瘤大小达到60 mm3时，将异种移植小鼠分为两组：对照组和奥拉帕尼。奥拉帕尼通过腹腔给药以10mg/kg /天的剂量给药2周。

　　用卡尺测量肿瘤直径，并使用以下公式计算肿瘤体积：长（mm）×宽（mm）。我们首先评估奥拉帕尼对SKOV3，A2780和OVCAR-3卵巢细胞存活率的影响。癌症线。通过细胞计数试剂盒（CCK-8）测定来确定奥拉帕尼诱导生长抑制的最低有效剂量。奥拉帕里布抑制卵巢癌细胞系的生长，治疗48小时后，SKOV3细胞的IC50值为21.09μM，A2780细胞为5.94μM，OVCAR-3细胞为12.23μM。为了进一步阐明生长抑制作用，我们使用CCK-8分析了存在奥拉帕尼（5μM）的情况下SKOV3，A2780和OVCAR-3的细胞活力。细胞将分为两组：对照组和奥拉帕尼组。使用酶标仪测量450 nm波长的光密度。

　　C和D所示，与对照组相比，奥拉帕尼组的细胞增殖减慢，并且在24小时和30小时时明显减少。结果提示奥拉帕尼治疗以时间依赖性方式抑制卵巢癌细胞的增殖。流式细胞仪分析了奥拉帕尼（2.5–20μM）对卵巢癌细胞SKOV3，A2780和OVCAR-的凋亡的影响。将细胞分为五组：对照组和奥拉帕尼组。 Annexin-V-FITC和PI双染用于分析细胞凋亡。在SKOV3细胞中，在不同的奥拉帕尼治疗组中凋亡率分布是不同的。在空白对照组中，细胞凋亡率仅为3.94％。与之相比，在高剂量测试组中，凋亡细胞的百分比显着增加至12.51％和13.29％（p <0.01）。然而，低剂量的细胞凋亡率分别为7.47％和6.78％。