瑞博西尼Ribociclib对脓毒症所致急性肾损伤的保护作用及机制

　　目的：探讨瑞博西尼Ribociclib在脓毒症诱发的急性肾损伤（AKI）中的作用及其可能机制。　　

　　方法：(1)20只成年雄性C57BL/6小鼠分为假手术组(Sham组；只开腹不结扎或穿孔盲肠，假手术前12小时给予乳酸钠缓冲液)、Ribociclib对照组(给予150mg/kgRibociclib）、盲肠结扎和穿刺（CLP）组（CLP诱导的脓毒症模型；CLP前12小时灌胃乳酸缓冲液）、Ribociclib预处理组（12小时前给予150mg/kgRibociclib）CLP)根据随机数字表，每组5只小鼠。手术后12小时收获肾脏。苏木精-伊红(HE)染色观察肾脏病理变化。通过酶联免疫吸附试验（ELISA）测量小鼠肾脏匀浆中的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平。WesternBlot检测细胞周期相关蛋白磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白(p-Rb)、凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。(2)小鼠肾小管上皮(TCMK-1)细胞系用于体外实验。细胞分为对照组、Ribociclib组（5μmol/LRibociclib处理24小时）、脂多糖（LPS）组（200mg/LLPS处理6小时）、Ribociclib+LPS组（更换培养基）含5μmol/LRibociclib和200mg/LLPS6小时后用5μmol/LRibociclib暴露18小时）。ELISA检测细胞培养基中的炎性细胞因子。p-Rb、Bcl-2和Bax的表达，　　

　　结果：(1)动物实验表明，与Sham组相比，小鼠肾脏组织损伤明显，TNF-α、IL-6水平升高，p-Rb和Bcl-2/Bax比值表达升高。CLP组肾组织减少；Ribociclib对照组与Sham组各项指标差异无统计学意义。与CLP组相比，Ribociclib预处理小鼠肾损伤显着改善，病理评分显着降低（1.48±0.16vs.2.68±0.16，P<0.01），肾组织TNF-α和IL-6水平显着降低。匀浆显着降低[TNF-α（ng/g）：340.55±34.96vs.745.08±58.86，IL-6（mg/g）：17.33±1.01vs.114.20±20.49，均P<0.01]，p-Rb进一步降低（p-Rb/β-微管蛋白：0.14±0.01vs.0.73±0.06，P<0.01），Bcl-2/Bax比值增加（0.89±0.06vs.0.62±0.10，P<0.01）。(2)体外实验表明，与对照组相比，TNF-α和IL-6的释放增加，p-Rb的表达减少，Bcl-2/Bax和LC3bII/I的比值降低。LPS组p62、p-AKT和p-mTOR的表达降低；Ribociclib处理TCMK-1细胞后p-Rb的表达降低。与LPS组相比，TNF-α和IL-6降低[TNF-α（ng/L）：2.73±0.23vs.4.96±0.10，IL-6（ng/L）：36.05±5.83vs.53.78±24.08，均P<0.01]，p-Rb表达进一步降低（p-Rb/β-微管蛋白：0.25±0.05vs.0.65±0.05，P<0.01），Bcl-2/Bax和LC3b的比值II/I增加（Bcl-2/Bax：1.01±0.07vs.0.73±0.05，LC3bII/I：2.08±0.31vs.1.04±0.01，均P<0.05）。　

　　结论：Ribociclib瑞博西尼预处理改善了脓毒症引起的AKI，AKT/mTOR通路可能与Ribociclib对肾脏的保护作用有关。详情请扫码咨询：