Trametinib曲美替尼通过扰乱细胞周期和诱导衰老对RAS和BRAF突变的黑色素瘤进行放射增敏

　　目的：放射疗法(RT)经常用于黑色素瘤患者，但由于该疾病通常具有放射抗性，因此结果并不理想。这可能是由于涉及RAS/RAF的突变导致MAPK通路信号传导的组成性激活。因此，我们研究了曲美替尼trametinib（一种有效的选择性MEK1/2变构抑制剂）是否可以提高放疗的疗效。　

　　方法和材料：在人BRAF突变体(A375)、NRAS突变体(D04,WM1631)、KRAS突变体(WM1791c)和野生型(PMWK)黑色素瘤细胞系中进行克隆形成存活试验。通过免疫印迹分析测量曲美替尼trametinib加和不加辐射对MEK效应蛋白水平的影响。分别使用流式细胞术、γH2Ax染色、核碎裂和β-半乳糖苷酶染色测量细胞周期效应、DNA损伤修复、有丝分裂灾难和衰老。此外，具有D04侧腹肿瘤的无胸腺小鼠在用曲美替尼trametinib灌胃后用分级RT治疗并监测肿瘤生长。　　

　　结果：与单独使用任何一种药物相比，当RT与曲美替尼trametinib联合使用时，除PMWK外，所有细胞系都表现出增强的细胞毒性。A375、D04、WM1361和WM1791c的增敏剂增强比分别为1.70、1.32、1.10和1.70。Trametinib在纳摩尔浓度下有效阻断RT诱导的ERK磷酸化。放射敏感性增加与延长的G1期阻滞和抗辐射S期减少相关，直至RT后48小时。在曲美替尼trametinib预处理组中观察到大量衰老激活的β-半乳糖苷酶阳性细胞，这与诱导衰老的两种主要介质p53和pRb的激活相关。与单独接受曲美替尼trametinib(p=0.016)或单独接受放疗(p=0.047)的小鼠相比，接受联合治疗（曲美替尼trametinib1mg/kg和放疗超过3天）的小鼠显示平均肿瘤体积减少。没有观察到明显的药物毒性迹象。　　

　　结论：曲美替尼trametinib通过诱导延长的G1期阻滞和过早衰老来放射增敏RAS-/RAF突变的黑色素瘤细胞。在这项临床前研究中，我们证明曲美替尼trametinib和RT的结合具有良好的耐受性，并减少了体内肿瘤的生长。详情请扫码咨询：