达克替尼Dacomitinib在体内增强拓扑替康的抗癌功效

　　背景：ATP结合盒亚家族G成员2(ABCG2)是ABC转运蛋白超家族蛋白的成员，通过将底物抗癌药物转运出癌细胞并减少其细胞内积累来介导多药耐药(MDR)。MDR是成功化疗的主要障碍。克服MDR的一种合乎逻辑的方法是抑制转运蛋白。然而，临床上尚未批准安全有效的MDR抑制剂。　

　　方法：采用MTT法评价细胞毒性和MDR逆转作用。通过流式细胞术测量药物流出和细胞内药物积累。建立H460/MX20细胞异种移植模型以评价达克替尼在体内增强拓扑替康的抗癌功效。为了确定达克替尼与ABCG2底物结合位点的相互作用，达克替尼与[125I]-碘芳基叠氮哌唑嗪(IAAP)。　　

　　在一系列不同浓度的达克替尼存在下测量ABCG2的钒酸盐敏感性ATP酶活性，以评估达克替尼对作为转运蛋白能量来源的ATP水解的影响。采用流式细胞术和蛋白质印迹法研究达克米宁是否能抑制ABCG2的表达水平。通过实时定量RT-PCR分析ABCG2的mRNA表达水平。Westernblotting检测AKT、ERK蛋白表达水平及其磷酸化水平。　　

　　结果：在这里，我们发现达克替尼是一种不可逆的泛ErbB酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，在III期临床试验中，可以增强常规化疗药物的疗效，特别是在ABCG2过度表达的MDR癌细胞中，但在亲本敏感细胞中没有。发现达克替尼通过抑制转运蛋白外排功能显着增加ABCG2探针底物[阿霉素(DOX)、罗丹明123(Rho123)和Hoechst33342]的积累。　　

　　此外，达克替尼刺激ABCG2ATPase活性并与[125I]-IAAP以浓度依赖性方式对ABCG2进行光标记。然而，达克替尼不会改变蛋白质和mRNA水平的ABCG2表达，也不会抑制AKT和ERK的ErbB下游信号传导。重要的是，达克替尼显着增强了拓扑替康在裸鼠ABCG2过表达H460/MX20细胞异种移植物中的功效，而不会产生额外的毒性。　　

　　结论：这些结果表明达克替尼Dacomitinib通过抑制ABCG2外排功能和增加抗癌药物的细胞内积累来逆转ABCG2介导的MDR。我们的研究结果提倡对ABCG2过表达MDR肿瘤的癌症患者进行达克替尼联合常规化疗的进一步临床研究。详情请扫码咨询：