吉非替尼(Gefitinib)耐药后的治疗靶点

　　表皮生长因子受体的体细胞突变通常会导致对非小细胞肺癌 (NSCLC) 酪氨酸激酶抑制剂治疗产生耐药性。在本研究中，我们旨在确定可在 NSCLC 细胞中与吉非替尼（Gefitinib）联合诱导细胞死亡的伙伴药物和途径。我们进行了全基因组 RNAi 筛选，以确定吉非替尼在酪氨酸激酶抑制剂抗性细胞中的合成致死率。筛选数据用于不同的方法。首先，我们确定PRKCSH作为候选基因，其沉默诱导吉非替尼处理的 NSCLC 细胞凋亡。接下来，在一个计算机中通过 shRNA 文库数据的基因特征通路分析，观察到参与 CD27 信号级联的基因的强相关性。我们发现达沙替尼（NF-κB 通路抑制剂）与吉非替尼的组合协同抑制了 NSCLC 细胞的生长。最后，利用连通图，硫利达嗪被确定为顶级药物干扰素。在我们的实验中，它与吉非替尼协同降低 p-Akt 水平并诱导 NSCLC 细胞凋亡。总之，一个汇集的短发夹库筛选确定了几个潜在的途径和药物，可以作为吉非替尼耐药性 NSCLC 的治疗靶点。

　　最初的广泛临床研究发现，只有少数非小细胞肺癌 (NSCLC) 患者对吉非替尼（Gefitinib）或厄洛替尼有反应，后者是阻断表皮生长因子 (EGFR) 激活的酪氨酸激酶抑制剂 (TKIs) 。注意到亚洲非吸烟女性对此类药物特别敏感。随后，调查人员发现这些TKI的该灵敏度与影响EGFR的激酶结构域的体细胞突变，尤其是存在相关或者外显子19或外显子21一L858R突变内缺失。患有这些肿瘤的个体通常对 TKI 治疗有反应，但通常在治疗 6-12 个月后疾病进展。这些耐药肿瘤经常获取或者在EGFR外显子20中的另外的突变（T790M）或EGFR的下游途径的第二突变，都导致缺乏响应于EGFR-TKI。其他耐药机制包括c-met 的扩增或PTEN 的缺失。一个主要的治疗重点是确定可以逆转外显子 20 突变 EGFR 中 TKI 耐药性的药物。为了发现可能抑制具有外显子 20 突变 EGFR 的 NSCLC 生长的其他药物和途径，我们使用短发夹文库筛选了与吉非替尼的协同作用并确定了几种抑制这些的分子生物学途径和药物化合物TKI 抗性 NSCLC 细胞。

　　几乎所有具有 EGFR 外显子 19 或 21 突变的新诊断 NSCLC 患者对 TKI 治疗都有初始反应。然而，总是在 6-12 个月后，肿瘤对治疗产生耐药性，这与额外的基因组变化有关，尤其是 T790M EGFR 突变。与 HIV 治疗的经验教训类似，用一种以上的药物治疗这些非小细胞肺癌可能会阻止耐药克隆的出现。因此，我们在 NSCLC 细胞中使用汇集的短发夹 RNA 文库对吉非替尼进行了合成致死率筛选，以帮助确定 TKI 耐药性 NSCLC 中可成药的途径。此外，shRNA 文库数据用于吉非替尼相关通路分析和基于计算机基因签名的检查。

　　总之，shRNA 文库筛选确定了吉非替尼（Gefitinib）治疗 EGFR 突变 NSCLC 包括 EGFR T790M 的治疗伙伴。此外，shRNA 文库数据用于基于基因签名的计算机内查询，将PRKCSH确定为吉非替尼的有趣合作伙伴。最后，shRNA 结果用于查询连接图。该通路分析将硫利达嗪确定为吉非替尼的协同合作伙伴。总之，这项使用多种实验方法的研究已经确定了令人兴奋的药物和途径，可用于在 EGFR 突变 NSCLC 中进行进一步研究。微信扫描下方二维码了解更多：