米托坦/密妥坦作用是否会被CYP11B1影响

　　米托坦（密妥坦）是肾上腺皮质癌 (ACC) 的参考药物，该药物的代谢活化被认为对其活性至关重要。本研究的目的是评估 CYP11B1 对 H295R ACC 细胞中米托坦作用和代谢的作用，以了解该酶是否会影响米托坦作用。与米托坦和甲吡酮（一种靶向 11-β-羟化酶的肾上腺素溶解分子）同时孵育不会影响 H295R ACC 细胞中米托坦介导的细胞毒作用和代谢。CYP11B1 沉默证实美替拉酮对米托坦作用没有显着影响。目前的研究结果不支持 CYP11B1 催化米托坦代谢活化的关键步骤以及 CYP11B1 赋予米托坦肾上腺特异性的观点。

　　肾上腺皮质癌 (ACC) 是一种罕见的恶性内分泌肿瘤，预后通常较差。米托坦（密妥坦）是杀虫剂二氯二苯基三氯乙烷 (DDT) 的一种代谢物，是 ACC 的参考治疗方法，可用于 ACC 摘除后的术后辅助治疗，或用于治疗晚期 ACC。米托坦作用于肾上腺，抑制细胞生长并损害类固醇生成。抑制类固醇生成的关键步骤可能发生在可能涉及 CYP11A1 的线粒体中，CYP11A1 是一种催化胆固醇转化为孕烯醇酮的线粒体酶。米托坦治疗患者中 11-脱氧皮质醇和 11-脱氧皮质酮水平升高表明米托坦可能影响 CYP11B1。

　　米托坦是用于先进ACC参考药物和临床医生利用任一其细胞毒性作用或不同类固醇合成酶的抑制。米托坦在 60 年代被引入临床用于治疗晚期 ACC，但其作用机制仍知之甚少。米托坦的治疗活性需要对其进行代谢转化的概念得到了观察到的药物促肾上腺皮质激素作用的巨大种间差异的支持，这种差异与不同的肾上腺转化米托坦的能力相平行。有人提出米托坦的代谢转化发生在肾上腺线粒体中，CYP11B1 可能参与米托坦的初始羟基化。激活米托坦需要 CYP11B1 的事实可能赋予米托坦组织特异性，从而解释了为什么米托坦不影响 SW13 细胞，后者不表达 CYP11B1。然而，最近的一项研究挑战了米托坦代谢物对于解释抗肿瘤作用很重要的概念，其中发现 o,p'-DDA 在 H295R 细胞中无活性。下游稳定的代谢物可以简单地反映酰氯的形成过程。这个问题仍然存在争议，因为我们小组的体外研究发现米托坦代谢物（o,p'-DDE 和 o,p'-DDA）在 H295R 细胞中具有细胞毒活性。此外，还有一项研究表明，晚期 ACC 患者的 o,p'-DDA 水平升高与更好的患者预后相关。

　　目前的研究结果不支持 CYP11B1 催化米托坦代谢活化的关键步骤的观点，因为 H295R 细胞与米托坦和美替拉酮（一种能够抑制 CYP11B1 的药物）同时孵育不会影响米托坦介导的细胞毒性影响。此外，在我们的实验模型中，特定 siRna 的 CYP11B1 沉默不会改变米托坦的作用。相应地，CYP11B1 活性或基因表达的变化也对米托坦转化没有任何重大影响。在 H295R 细胞中，米托坦吸收和代谢为 o,p'-DDE 和 o,p'-DDA 在美替拉酮处理或 CYP11B1 沉默后没有改变。

　　H295R 细胞与米托坦和美替拉酮同时孵育对皮质醇产生产生更大的影响。这与 CYP11B1 不代表米托坦诱导的肾上腺类固醇生成抑制的主要靶点的观点一致，尽管在取自接受治疗的患者的肾上腺切片中显示了 CYP11B1 和 18-羟基化 (CYP11B2) 的抑制作用与米托坦 。最近的体外研究没有解决米托坦是否能够持续影响 CYP11B1 的问题。然而，目前的研究结果证实了这两种药物对控制严重库欣综合征的协同作用并让医生放心，美替拉酮的结合不会影响米托坦的抗肿瘤功效。这是临床相关的，因为与 ACC 相关的库欣综合征的管理通常具有挑战性，而米托坦具有起效延迟的缺点；因此，与美替拉酮等速效药物联合使用可能有助于快速控制严重的皮质醇过量。

　　总之，我们已经表明，通过化学或分子抑制，H295R 细胞中的 CYP11B1 调节不能影响米托坦（密妥坦）的作用。这些数据反对 CYP11B1 可能在米托坦的代谢激活中起关键作用以确保其抗肿瘤活性的观点。其他机制可以解释为什么米托坦因其细胞毒性作用而靶向肾上腺。最近已经证明米托坦如何抑制主要由肾上腺表达的甾醇-O-酰基转移酶 1 (SOAT1)。这种酶的抑制导致游离胆固醇在细胞毒性水平的积累。相反，类固醇生成的抑制作用不仅限于肾上腺，因为米托坦能够削弱接受长期治疗的患者睾丸激素的产生。微信扫描下方二维码了解更多：