多吉美索拉非尼联合HER-2靶向疫苗可促进体内有效T细胞免疫

　　肿瘤微环境 (TME) 是通过肿瘤细胞和宿主基质元素之间复杂的相互作用建立和维持的。因此，针对肿瘤多种细胞成分的疗法可能是有效的。多吉美索拉非尼是一种多激酶抑制剂，可改变肿瘤细胞和宿主基质细胞的信号通路。因此，我们探索了索拉非尼在小鼠 HER-2-(neu) 过表达乳腺肿瘤模型中的潜在免疫调节作用，以及与 HER-2 靶向粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF)-分泌疫苗（3T3neuGM）。

　　体外，索拉非尼抑制 HER-2 过表达 NT2.5 肿瘤细胞的生长，诱导细胞凋亡。索拉非尼还干扰 ERK MAPK、p38 MAPK 和 STAT3 信号传导以及细胞周期蛋白 D 表达，但不影响 HER-2 或 AKT 信号传导。在体内，单药索拉非尼破坏了肿瘤相关的脉管系统并诱导肿瘤细胞凋亡，有效诱导免疫活性 FVB/N 小鼠中已建立的 NT2.5 肿瘤消退。免疫耗竭研究表明，肿瘤消退需要CD4+和 CD8+T 细胞。相对于索拉非尼治疗或单独接种疫苗，索拉非尼治疗不影响荷瘤 FVB/N 小鼠接种 3T3neuGM 诱导的肿瘤清除率。体内研究进一步表明，索拉非尼增强了 CD4+和 CD8+T 细胞在接种疫苗小鼠的 TME 中的积累。

　　总之，这些发现表明分泌 GM-CSF 的细胞免疫疗法可以与索拉非尼结合，而不会损害基于疫苗的免疫反应。

　　多吉美索拉非尼是一种小分子血管生成抑制剂，旨在抑制 RAF/MEK/ERK 信号。它具有许多脱靶效应，包括抑制野生型和突变型 BRAF、STAT3 和受体酪氨酸激酶 VEGFR2、VEGFR3 和 PDGFR-β 。索拉非尼已获得 FDA 批准用于治疗肝细胞癌 (HCC)、肾细胞癌 (RCC) 和分化型甲状腺癌 (DTC) ，并且还在其他类型的肿瘤中进行研究。据报道，索拉非尼通过降低 CD4+CD25+FoxP3+的频率来支持抗肿瘤免疫不影响 RCC 患者外周效应 T 细胞功能的调节性 T 细胞 (Tregs)。相反，索拉非尼已显示通过减少 DC 成熟、迁移和 T 细胞启动来抑制树突状细胞 (DC) 功能。所述可变的正和对肿瘤特异性免疫索拉非尼的负面影响表明其免疫调节活性可以是上下文和浓度依赖性的。

　　考虑到索拉非尼的既定临床适应症、临床上免疫疗法的使用越来越多以及索拉非尼的复杂免疫效应，我们研究了索拉非尼单独和联合基于 DC 的、靶向 HER-2 的 GM 的免疫调节作用-在荷瘤免疫活性 FVB/N 小鼠中分泌脑脊液疫苗 (3T3neuGM)。在这里，与之前关于索拉非尼可以抑制基于 DC 的疫苗接种的报道相反，我们表明索拉非尼不会抑制由 3T3neuGM 诱导的 HER-2 特异性 T 细胞反应。相反，它通过增加肿瘤细胞死亡、破坏肿瘤相关脉管系统和增加 CD4+和 CD8+的积累来支持疫苗诱导的肿瘤清除肿瘤部位的 T 细胞。

　　此处提供的数据支持多项新发现。首先，酪氨酸激酶抑制剂索拉非尼在体外和体内抑制 NT2.5 乳腺癌细胞的生长。体外研究表明，细胞生长抑制通过 MAPK 依赖性和独立机制发生。其次，索拉非尼治疗的 NT2.5体内肿瘤的消退是 T 细胞依赖性的，需要 CD4+和 CD8+T 细胞。第三，索拉非尼治疗与疫苗接种相结合，增加了 TME中内源性 CD8+T 细胞的数量。最后，索拉非尼作为单一药物或与 3T3neuGM 联合使用可增加分泌 IFNγ 的 CD4+TME 中的 T 细胞。总的来说，这项研究有效地证明了同时治疗索拉非尼和肿瘤抗原特异性、基于 DC 的疫苗策略的潜力，以诱导有效的肿瘤免疫。

　　成功靶向 TME 中多个通路的癌症疗法理论上将带来更大的临床益处，部分原因在于它们能够靶向对疾病进展至关重要的多个致癌通路。在这里，我们表明单药多吉美索拉非尼通过多种机制抑制HER2+乳腺肿瘤的生长，包括抑制细胞生长、诱导细胞死亡和抑制血管生成。在体内，每天服用 30 mg/kg 索拉非尼的小鼠完全清除了大多数经治疗的荷瘤 FVB/N 小鼠的 NT2.5 肿瘤，并表现出增加的肿瘤细胞死亡，这反映在活化的半胱天冬酶 3 表达增加。这些数据与索拉非尼在其他癌症模型中对 Ras/MEK/ERK 通路的影响一致。我们扩展了这些发现以表明与使用 p38 MAPK 或 ERK MAPK 特异性抑制剂治疗相比，使用索拉非尼治疗后 MAPK 下游靶标细胞周期蛋白 D1 的表达降低最大。与单独的 p38 MAPK 或 ERK MAPK 抑制剂不同，索拉非尼治疗也降低了细胞周期蛋白 D3 的表达。这些发现表明，索拉非尼靶向对细胞周期进程和增殖至关重要的 MAPK 独立途径，并且与先前发表的报告一致，表明细胞周期蛋白 D1 和细胞周期蛋白 D3 受到不同调节。针对这两种细胞周期蛋白的疗法在抑制细胞生长和成功诱导肿瘤消退方面可能最有效。我们还表明，索拉非尼显着减少了 TME 内 CD31/PECAM 阳性微血管的数量，这与所报道的药物抗血管生成作用一致。

　　微信扫描下方二维码了解更多：