来那替尼(Neratinib)能杀死胰腺和血癌细胞

　　先前的研究表明，不可逆的 ERBB1/2/4 抑制剂来那替尼（Neratinib）导致质膜相关突变 K-RAS 定位在细胞内囊泡中，伴随着其降解。在此，我们发现来那替尼与化学性质不同的不可逆 ERBB1/2/4 抑制剂阿法替尼相互作用以降低 ERBB1、ERBB2、K-RAS 和 N-RAS 的表达；这与胰腺肿瘤细胞的细胞杀伤作用大于累加性有关。敲低 Beclin1、ATG16L1、Rubicon 或组织蛋白酶 B 显着降低来那替尼降低 ERBB1 和 K-RAS 表达的能力，并导致肿瘤细胞死亡。ATM-AMPK 的敲低抑制了囊泡的形成，组织蛋白酶 B-AIF 的敲低显着降低了来那替尼的致死率。PKG 磷酸化 K-RAS 和 HMG CoA 还原酶抑制剂减少 K-RAS 法呢基化，这两者都从质膜中去除 K-RAS，消除其活性。

　　来那替尼与 PKG 激活剂西地那非和 HMG CoA 还原酶抑制剂阿托伐他汀相互作用，以进一步降低 K-RAS 表达，并进一步增强细胞杀伤。Neratinib 也是 Ste20 激酶家族抑制剂，在癌细胞和缺乏 ERBB1/2/4 的造血癌细胞中，它降低了 K-RAS 表达和 MST1/3/4/Ezrin 的磷酸化约 30%。来那替尼使 LATS1 磷酸化以及 YAP 和 TAZ 的磷酸化也增加了约 30%，导致大部分 YAP 转移到细胞质中并降低 YAP/TAZ 蛋白水平。通过敲低 YAP，来那替尼的致死率有所提高。来那替尼，以 Rubicon 依赖的方式，降低 PAK1 磷酸化及其底物 Merlin 的磷酸化。我们的数据表明，来那替尼协同抑制突变 K-RAS 和 YAP 功能以杀死胰腺肿瘤细胞。

　　来那替尼被开发用于抑制 ERBB1/2/4。随后通过化学生物学技术假设它在抑制多种 Ste20 家族激酶方面也具有同等效力：MST3、MST4、MAP4K5 和 MAP4K3。相比之下，化学上不同的不可逆 ERBB1/2/4 抑制剂阿法替尼据称不抑制 Ste20 家族激酶。来那替尼在患者血浆中的安全 C max 为 ~150 nM，计算的来那替尼对低于 100 nM 激酶的体外 IC50 抑制浓度还包括：GCN2、MAP4K1、MAP3K4、MST2、SLK、YSK1 和 YSK4。因此，来那替尼对肿瘤细胞生物学的影响可能是多因素的，并且可能与 ERBB 家族受体无关。

　　对于声称来那替尼在低于 10 nM 浓度下抑制的激酶，已发表以下信息：MST3/4 控制上皮细胞的顶端刷状缘；来那替尼的主要剂量限制性毒性是腹泻，认为来那替尼以靶向 MST3/4 依赖性方式作用导致该事件。MAP4K5 是一种顶端激酶，与 G 蛋白偶联受体下游的 GTP 结合蛋白相互作用，并将 GPCR 信号连接到 MAPK 通路。MAP4K5 和 MAP4K3 磷酸化并激活 LATS1/2 激酶，后者又磷酸化并抑制 YAP/TAZ，这是 Hippo 通路的主要效应物。MAP4K3 的信号传导也已显示在氨基酸信号传导至 mTOR/p70 S6K 中发挥重要作用。因此，来那替尼可能能够阻止突变 K-RAS 和 Hippo 通路的信号传导；共同对胰腺癌细胞的生长和活力有害的事件。

　　我们之前曾在表达突变活性 ERBB1 的 H1975 NSCLC 细胞中发表文章，不可逆 ERBB1/2/4 抑制剂来那替尼（Neratinib）比另一种不可逆 ERBB1/2/4 抑制剂阿法替尼具有更大的下调 ERBB1 表达的潜力。来那替尼比阿法替尼显着降低其他肿瘤细胞类型中 ERBB1、ERBB2、K-RAS 和 N-RAS 的蛋白质水平；虽然阿法替尼，大概通过 ERBB1/2/4 起作用可以下调受体。与阿法替尼不同，来那替尼不仅抑制 ERBB1/2/4 受体酪氨酸激酶家族，还抑制丝氨酸/苏氨酸激酶 Ste20 家族的多个成员，包括 MST3 和 MST4。在实体瘤细胞和血癌细胞中，来那替尼阻止 MST3/4 自磷酸化和下游底物 Ezrin 的磷酸化。在两种类型的肿瘤细胞中，来那替尼都降低了 K-RAS 的表达。其他人最近也表明，来那替尼和阿法替尼在实体瘤细胞系中可以降低 ERBB1/2/3 的表达。微信扫描下方二维码了解更多：