劳拉替尼(Lorlatinib)药代动力学研究

　　在本研究中，我们开发并验证了一种快速简便的液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 方法，用于测定小鼠血清和组织样品中的劳拉替尼（Lorlatinib），该方法成功应用于研究药代动力学口服给药后劳拉替尼的研究和组织分布。样品经甲醇处理沉淀蛋白质并提取药物，Afatinib-d6作为内标（IS）。对于 LC-MS/MS 分析，在 C18 柱上通过梯度洗脱（0.1% 甲酸和甲醇）在正离子模式下以 0.5 mL/min 分离化合物，m/z407.28 [M + H]+用于劳拉替尼和m/z492.10 [M + H]+对于 IS。在校准范围内观察到良好的线性。选择性、准确度（-6.42% 至 8.84%）、精密度（1.69% 至 10.98%）、回收率（91.4% 至 115.0%）和基质效应（84.2% 至 110.6%）均在可接受的范围内。口服后，劳拉替尼的血清浓度迅速达到最大浓度（2,705.683 ± 539.779 μg/L) 在 0.625 ± 0.231 小时。在肝脏中检测到最高浓度 (3,153.93 ng/100 mg)，其次是胃 (2,159.92 ng/100 mg) 和肾脏 (548.83 ng/100 mg)。总之，建立并验证了一种简单快速的检测方法，用于测定小鼠血液和组织样品中的劳拉替尼。使用该方法成功地研究了劳拉替尼的药代动力学研究和组织分布。

　　第一代间变性淋巴瘤激酶 (ALK) 抑制剂克唑替尼、第二代 ALK 抑制剂色瑞替尼和艾乐替尼已被用作携带 ALK 或 ROS1 的非小细胞肺癌 (NSCLC) 的一线治疗重排。然而，在使用 ALK 抑制剂治疗 ALK 阳性 NSCLC 中存在两个重要的临床问题。在 ALK 重排的 NSCLC 中通常检测到脑转移，并且 3 年时 BM 的累积发生率为 58.4%。预防 BM 是 ALK 阳性 NSCLC 治疗的第一个挑战。第一代ALK-酪氨酸激酶抑制剂(TKI)中枢神经系统渗透性较差，第二代ALK-TKI的颅内疗效有所提高。此外，第二个挑战是几种耐药机制，如继发性突变耐药和旁路信号通路的激活，可能会在肿瘤治疗过程中引起耐药性。为了控制颅内疾病和突变抗性，劳拉替尼被开发为靶向 ALK 和 ROS1 的第三代 TKI 。此外，体外试验表明劳拉替尼比前几代 ALK-TKI 具有更大的效力和选择性。更重要的是，它在接受过前几代 ALK-TKI 治疗的患者中仍然非常活跃。此外，劳拉替尼由于其高脑穿透能力，可诱发颅内反应并引起神经系统副作用。

　　对小鼠血清中劳拉替尼的定量分析很少有生物分析方法的描述。在以前的研究中，蛋白质沉淀用作预处理步骤，液相色谱-串联质谱 (LC-MS/MS) 测定用于定量劳拉替尼。然而，没有可用的方法对含有更多内源性物质的组织中的劳拉替尼进行定量。劳拉替尼在大脑中的分布对于控制脑转移至关重要。然而，没有关于劳拉替尼的生物分布的体内研究。因此，建立一种简单、灵敏的方法来定量血清和组织样本中的劳拉替尼是非常必要的。

　　在本研究中，我们开发了一种简单且灵敏的 LC-MS/MS 方法，用于测定小鼠血清和组织样本中的劳拉替尼。

　　为了说明劳拉替尼的分布，我们分析了不同时间点不同组织中的劳拉替尼浓度。在每个组织中，劳拉替尼的最大浓度出现在 0.5 小时。此时，肝脏中的浓度最高（3,153.93 ng/100 mg），其次是胃（2,159.92 ng/100 mg）、肾脏（548.83 ng/100 mg）、小肠（540.64 ng/100 mg）、心脏 (367.31 ng/100 mg)、肺 (309.39 ng/100 mg)、大肠 (289.85 ng/100 mg)、脾 (246.81 ng/100 mg) 和脑 (185.03 ng/100 mg)。口服给药的首过效应可能是在肝脏中高分布的主要原因。胃和小肠中的高浓度表明劳拉替尼主要被胃和小肠吸收。虽然劳拉替尼是第三代 ALK 抑制剂，专门设计用于穿透血脑屏障，大脑中没有预期的高浓度劳拉替尼。相比之下，劳拉替尼在肌肉组织（如心脏）中的分布更高，表明劳拉替尼的亲脂性不足以帮助药物穿过血脑屏障。肾脏有高浓度的劳拉替尼，这意味着劳拉替尼可能被肾脏排泄。肝脏中高浓度的劳拉替尼可能是由于肝脏代谢缓慢，导致肝脏中高浓度的劳拉替尼。表明劳拉替尼的亲脂性不足以帮助药物穿过血脑屏障。肾脏有高浓度的劳拉替尼，这意味着劳拉替尼可能被肾脏排泄。肝脏中高浓度的劳拉替尼可能是由于肝脏代谢缓慢，导致肝脏中高浓度的劳拉替尼。表明劳拉替尼的亲脂性不足以帮助药物穿过血脑屏障。肾脏有高浓度的劳拉替尼，这意味着劳拉替尼可能被肾脏排泄。肝脏中高浓度的劳拉替尼可能是由于肝脏代谢缓慢，导致肝脏中高浓度的劳拉替尼。

　　在本研究中，我们建立了一种简单、快速的检测方法，并验证了该方法用于小鼠血液和组织样本中劳拉替尼的测定。使用该方法成功地研究了药代动力学研究和组织分布。劳拉替尼（Lorlatinib）在心脏中的高浓度表明药物的亲脂性没有预期的那么高，导致大脑中的浓度低，即使劳拉替尼旨在穿透血脑屏障。肾脏和肝脏中高浓度的劳拉替尼表明肾脏是消除劳拉替尼的主要器官，肝脏代谢缓慢。微信扫描下方二维码了解更多：