达拉非尼(Dabrafenib)的肾毒性研究

　　Dabrafenib（达拉非尼）是TAFINLAR和GSK2118436的同义词，是ATP竞争性RAF激酶活性抑制剂。RAF激酶是丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶家族，参与丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK）通路，该通路是介导细胞增殖，分化和存活的信号级联反应。MAPK途径各个组成部分的遗传突变与许多人类癌症的进展有关，包括黑色素瘤，其中约有50％的恶性肿瘤中存在BRAF突变。达拉非尼已被批准用于成人BRAF的治疗V600E突变阳性肿瘤可与曲美替尼（一种有丝分裂原激活的蛋白激酶1和2（MEK1 / MEK2）的变构性非竞争性抑制剂）进行单药治疗和联合治疗。

　　为了支持达拉非尼的儿科发展，进行了一些临床和非临床研究，包括在幼年大鼠中的毒性研究。在确定的幼年大鼠毒性研究中，观察到了达拉非尼诱导的对发育中的肾脏的影响（Laffan等人，制备中的手稿）。在使用达布拉非尼进行的成年动物研究中，未观察到肾脏不良反应。幼年大鼠的肾镜检查结果包括肾小管沉积物，皮质囊肿的发生率增加，肾小管扩张和肾小管嗜碱性的发生率增加。在断奶前阶段[产后一天（PND）21之前]开始给药时，与幼仔相比，在断奶后开始给药（PND 22或更高版本）时，在幼仔开始给药时，肾脏毒性的发生率和严重性更高。由于阻塞性肾病的影响，肾小管沉积物被认为是肾脏近端部分其他肾脏发现的病因。未预料到少年肾脏中会形成肾脏沉积物，其机理尚不清楚。无法排除这些管状沉积物直接来源于达拉非尼和或其代谢产物的可能性。

　　在本报告中，我们提供了一项额外研究的结果，该研究进一步研究了对最初在定型幼年大鼠研究中观察到的达拉非尼诱导的肾毒性的潜在年龄敏感性。除了基于质谱的分析之外，这项研究还结合了多种分析方法，包括组织病理学评估，专门的临床化学和尿液分析。在这里，我们重点介绍了用于分析达拉非尼及其代谢产物在肾脏中的分布并确定肾脏沉积物分子组成的IMS实验结果。

　　作为一项研究性肾毒性研究的一部分，通过MALDI和LDI成像质谱（IMS）研究了出生后第7至35天出生后（PND）7至35岁之间不同年龄间隔口服达拉非尼幼年大鼠的肾脏组织，以确定管状沉积物的化学成分。在最年轻的年龄组（PND 7-13）中，MALDI IMS表明达拉非尼羧酸代谢物扩散定位于管状沉积物（髓质和皮质肾小管交界处）。但是，没有直接从沉积物中检测到达拉非尼相关材料。相反，LDI IMS分析确定沉积物主要由磷酸钙组成。根据这些数据，确定达拉非尼相关的肾毒性（包括肾小管沉积物的形成）与年龄有关。

　　进行了药物开发的非临床研究，以评估动物模型的安全性并为患者建立风险评估。传统上，毒理学家除了通过监测尿液或血浆中的病理生物标记物之外，还可以通过光学或电子显微镜对组织进行组织学检查来筛查不良结果。成像MS提供了一个平台，可以更直接地链接与毒理学效应相关的过程中涉及的化学和生物学。具体而言，将药物及其代谢物的组织分布与组织形态变化的位置重叠起来。MALDI和LDI IMS在本研究中的应用均作为该平台如何影响药物发现和开发的一个例子。通过表征达拉非尼代谢物的组织分布并确定管状沉积物的化学成分，与单独的LC-MS匀浆数据相比，IMS对未成年大鼠肾脏组织的分析能够增加对肾脏毒性的更深层的机械理解。根据这些数据以及组织学发现，可以更全面地评估使用dabrafenib进行儿科治疗的风险评估。微信扫描下方二维码了解更多：