达拉非尼(dabrafenib)是人类妊娠X受体的有效激活剂

　　人孕烷X受体（hPXR）被大量内源性和外源性化合物激活，在控制肝脏和胃肠道药物代谢和清除的解毒酶和转运蛋白的控制中起着关键作用。hPXR还参与了多药耐药性的发展和癌细胞侵袭性的增强。此外，它被药物意外激活会介导药物相互作用，并引起严重的不良事件。在这种情况下，尚未充分研究怀疑可能激活hPXR和人类组成型雄甾烷受体（hCAR）的抗癌BRAF抑制剂达拉非尼（dabrafenib）的潜力。使用不同的报告分子细胞检测方法，我们证明达拉非尼可以像其参考激动剂SR12813一样有效地激活hPXR，而它不会激活小鼠或斑马鱼PXR或hCAR。我们还显示达拉非尼与重组hPXR结合，诱导结肠LS174T-hPXR癌细胞和人肝细胞中hPXR响应基因的表达，并最终增加LS174T-hPXR细胞的增殖。我们的研究表明，通过使用一组不同的细胞技术，可以改善对新开发药物的hPXR激动剂活性的评估。

　　达拉非尼（dabrafenib）是BRAF丝氨酸/苏氨酸激酶的一种可逆的，高效ATP竞争性抑制剂，参与有丝分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）途径的调节。达布拉非尼的开发专门针对BRAF的V600E激活突变（BRAFV600E），该突变在超过40％的黑色素瘤中观察到，可能有助于疾病的发展。体外研究报道，BRAFV600E的IC50值为0.65 nM。

　　达拉非尼目前已被单独批准或与MEK抑制剂曲美替尼联合用于治疗转移性黑色素瘤。有趣的是，dabrafenib的处方通知表明它被CYP2C8和CYP3A4代谢，而其代谢物羟基-dabrafenib和去甲基-dabrafenib是CYP3A4的底物。此外，dabrafenib被描述为CYP3A4，CYP2C9，CYP2C8，CYP2C19和UGT酶的诱导剂，可能导致其各自底物的细胞内浓度降低。尽管这些作用可能是由于hPXR或hCAR介导的转录作用引起的，但达拉非尼可能直接影响这些核受体活性的可能性尚未得到充分研究。

　　达拉非尼的推荐剂量为150 mg，每天口服两次，血浆浓度为2160 ng / mL。给药后，dabrafenib主要被氧化代谢，生成羟基-dabrafenib，随后被羧基-dabrafenib脱羧，生成去甲基-dabrafenib，这是一种活性衍生物，可进一步转化为次要的氧化产物。已知CYP3A4和CYP2C8在这些代谢步骤中起主要作用，并且显示dabrafenib在体外和体内均可诱导CYP3A4和CYP2D6的表达。这些研究表明，参与药物代谢的基因的主要调节剂，例如核受体hPXR或hCAR，可以介导细胞对达拉非尼的反应并影响其他相关药物的作用。但是，尚无研究表征达布拉非尼的hPXR激动剂活性。我们的研究结果首次证明，与参考hPXR激动剂SR12813相似，达布拉非尼是过表达该核受体的各种细胞系中hPXR的选择性激活剂。对于dabrafenib和SR12813，hPXR反式激活在细胞类型方面均存在差异。这可能是由于HepG2，LS174T，22RV-1和HeLa细胞的代谢能力不同所致。在一起，这些结果证实达拉非尼可以调节异生物素代谢中涉及的关键酶的表达，并证明该作用与达拉非尼的hPXR激动剂特性有关。这些结果具有临床重要性，因为达布拉非尼可直接影响其自身的代谢或其他药物或药物的代谢，特别是MEK抑制剂（如曲美替尼）已被批准与达布拉非尼联合用于治疗转移性黑色素瘤。在这一方面，我们目前正在研究达布拉非尼是否可以增加过表达hPXR的黑素瘤细胞中代谢酶的活性，以及这是否会影响与曲美替尼共同治疗的疗效。

　　尽管达拉非尼（dabrafenib）通常通过靶向BRAFV600E来抑制癌细胞的增殖，但它也能诱导表达野生型BRAF和突变型RAS的肿瘤细胞系的增殖。体外研究报道，BRAFV600E的半数抑制浓度（IC50）值为0.65 nM。在这里，我们显示达拉非尼可以刺激EC50刺激LS174T-hPXR细胞的生长为28 nM。仅在hPXR稳定过量表达时才观察到此效应，强烈表明该效应至少部分地由hPXR介导，也可能归因于FGF19表达的增加，FGF19表达是一种已知参与细胞增殖的hPXR靶基因，并且在用达布拉非尼处理的LS174T-hPXR细胞中显着增加。有趣的是，PXR配体利福平也显示出可诱导FGF19介导的PXR转染的LS174T细胞增殖。在其血浆浓度（2160 ng / mL或4.15μM）下，dabrafenib有望在两种BRAFV600E上均具有活性和hPXR，表明使用较低浓度的dabrafenib可以提高其选择性，同时保持其功效。微信扫描下方二维码了解更多：