达克替尼/多泽润可显着降低EGF诱导ERK1/2磷酸化

　　对这些二聚体的下游靶标进行研究表明，达克替尼（多泽润）可显着降低EGF诱导的EGFR激活的ERK1 / 2磷酸化，但拉帕替尼则无此作用。另一方面，heregulin-1β显着诱导了AKT磷酸化，两种药物均抑制了AKT磷酸化。这表明，EGFR / HER2异源二聚化下游的ERK磷酸化将达克替尼与拉帕替尼的作用区分开来，并且由于存在达克替尼而缺乏EGFR / HER2膜定位，可能导致EGFR / HER2异二聚化降低。为了支持AKT在拉帕替尼诱导的体外生长中缺乏作用，对小鼠肿瘤的免疫印迹分析表明，在CWR22肿瘤中，拉帕替尼抑制了S473的AKT磷酸化，而T202 / Y204的ERK磷酸化没有改变。我们感兴趣地注意到，尽管拉帕替尼或达可替尼治疗后，细胞中E-钙黏着蛋白的水平仍保持一致（尽管较低），但EGFR或HER2膜定位的破坏保留了膜的完整性（一般来说可能是膜蛋白）。

　　最后，我们研究了拉帕替尼而非达克替尼治疗导致EGFR和/或HER2水平升高的可能机制。qRT-PCR分析表明，在22Rv1细胞中，拉帕替尼抑制EGFR，HER2和ErbB3 mRNA，表明转录调控不是HER2积累的原因。在C4-2细胞中观察到了类似的作用，其中mRNA水平的变化不明显。

　　另一方面，达克替尼可刺激22Rv1细胞中EGFR的mRNA水平，尽管它对HER2和ErbB3 mRNA的影响并不显着。尽管如此，拉帕替尼使HER2的蛋白水平显着增加。因此，我们调查了拉帕替尼治疗后翻译机制或翻译后机制的改变是否导致HER2水平升高。HER2表达由c-CBL，一个泛素连接酶调节使它退化并因此控制其水平。

　　我们调查了拉帕替尼治疗后蛋白酶体活性降低是否引起HER2积累。因此，我们在存在或不存在拉帕替尼或达克替尼的情况下，使用可逆蛋白酶体抑制剂MG-132模拟了这些情况。在存在或不存在2 μM拉帕替尼，达科替尼或5 μM MG-132或两者结合的情况下进行的24小时培养表明，MG-132处理降低了拉帕替尼的RTK积累，从而表明蛋白酶体活性是HER2积累的原因拉帕替尼治疗。MG-132与达克替尼协同作用以进一步降低HER2和ErbB3，因此达克替尼可能不影响蛋白酶体途径。同样，拉帕替尼对AR的水平也有影响，但达科替尼没有影响。但是，MG-132对AR水平没有影响。现在达克替尼的作用也是非常不错，更多详情可咨询下方微信。