索拉非尼(Sorafenib)和化疗药联合在乳腺癌中很有希望

　　分子靶向化合物正在成为改善经典化疗的一种策略。在此，我们描述了在 MDA-MB231 异种移植物和 4T1-12B 同系乳腺癌转移模型中，使用低剂量的多激酶抑制剂索拉非尼（Sorafenib）通过抑制血管生成、转移和促进肿瘤愈合来提高环磷酰胺的抗肿瘤活性。MDA-MB231 细胞的机制研究表明，烷基化以 MEK1/2-ERK1/2 依赖性方式上调炎症基因/蛋白质，如 COX-2、IL8、CXCL2 和 MMP1。这些蛋白质丰富了癌细胞的分泌组，通过自分泌和旁分泌机制刺激细胞侵袭和血管生成。索拉非尼抑制 MEK1/2-ERK1/2 通路，从而在基础和烷基化诱导条件下减少炎症基因并减轻细胞侵袭和血管生成，而参与烷基化存活的 NRF2 和 ER 应激通路不受影响。在非侵入性/非血管生成乳腺癌细胞（SKBR3 和 MCF7）中，烷基化不会引起炎症反应，索拉非尼的唯一作用是使用较高药物浓度时不依赖 ERK1/2 的 ROS 依赖性细胞毒性。总之，我们的数据显示烷化剂可能引发炎症反应，这似乎有助于特定乳腺癌细胞的恶性进展。识别和靶向这种表型的驱动因素可能为优化经典化疗药物和靶向药物之间的联合用药方案提供机会。

　　索拉非尼（Sorafenib）作为单药治疗乳腺癌的疗效有限，在许多情况下具有剂量限制性毒性。这些临床方案中的大多数使用最大患者耐受剂量的索拉非尼；这些研究中的抗肿瘤作用与诱导的氧化损伤相关。另一方面，索拉非尼和经典化疗药物的联合方案在乳腺癌临床试验中很有希望。在这项研究中，我们测试了索拉非尼是否可以提高烷化剂的疗效。在 MDA-MB231 异种移植物中，与单独使用任何一种药物相比，索拉非尼联合环磷酰胺导致的肿瘤更小。来自联合治疗的肿瘤被注意到包裹良好，纤维化，具有推动边界表型和血管生成减少，因此表明“愈合”表型。我们的结果还表明，烷基化除了直接杀死癌细胞外，还诱导能够刺激侵袭和血管生成的分泌组，可以用低剂量索拉非尼治疗阻断。这种解释得到了 4T1 原位模型中转移进展减少和生存期延长的证实。索拉非尼和 UO 阻断这种侵袭和血管生成促进分泌组表明 ERK1/2 依赖性作用，尽管索拉非尼抑制的其他靶点也可能在介导这种表型中发挥作用。基于肿瘤组织学和体外数据，诱导细胞死亡可能不是与低剂量索拉非尼在肿瘤治疗中获益相关的主要机制。然而，我们不能排除增殖的小幅下降——例如在 MDA-MB231（10 μM）和 Hs578t（5 和 10 μM）细胞中观察到的——可能在体内发挥作用。此外，索拉非尼（Sorafenib）对 VEGFR2 介导的血管生成的影响也可能通过降低体内营养物质和氧气的可用性间接影响肿瘤细胞增殖。

　　由于其阻断多种蛋白激酶的能力，以浓度依赖性方式具有不同的功效，据报道，索拉非尼（Sorafenib）可在体外引发多种反应。这包括抑制增殖、细胞毒性、线粒体功能障碍、ROS 产生和 ER 应激依赖性细胞死亡，这些似乎都是细胞系和浓度依赖性的。在我们的模型中，索拉非尼效应对烷基化反应的 MEK1/2-ERK1/2 臂具有选择性。相比之下，我们报告的 NRF2 和 ER 应激特征与烷基化存活有关，不受基因或蛋白质水平的影响。索拉非尼诱导的细胞毒性/细胞凋亡仅在较高浓度 (> 10 μM) 下发生，这是 ROS 介导的。这种细胞毒性与 ERK1/2 抑制或所测试细胞系的激素受体/三阴性状态无关。先前的研究还表明，索拉非尼的毒性既不与抑制 ERK1/2 相关，也不依赖于乳腺癌细胞系的 ER（雌激素受体）状态。

　　证据报告的各种线路，不同类的化疗药物，包括环磷酰胺，可以外周和肿瘤相关细胞（促炎症基因表达）。根据我们的结果，烷化剂诱导的炎症似乎不仅仅是相关反应，因为这些相同的基因已在患者存活和转移特征的研究中得到鉴定中的MMP1、IL8、VEGFA） ,EREG和PTGS2/COX-2。有趣的是，这些基因也与到cispatin和紫杉醇（IL6和IL8）癌细胞抗性相关。我们的异种移植和 4T1 转移模型数据以及上述研究表明，对环磷酰胺的炎症反应可能会对化疗疗效产生负面影响。然而，化疗诱导的体内炎症是由癌细胞的主动分泌引起的（正如我们在体外发现的），还是由与肿瘤细胞坏死相关的炎症，或衰老相关的分泌表型（SASP），或两者兼而有之，是难以确定。体外，我们无法检测到 SASP，因为大多数细胞都经历了凋亡。因此，需要进一步研究以确定哪些化疗药物和肿瘤细胞表型容易产生炎症反应，以及后者对免疫活性小鼠的治疗影响。

　　总之，我们的数据表明，某些癌症产生的炎症微环境可能导致恶性表型（即侵袭和血管生成），并且似乎对环磷酰胺（以及可能的其他药物）的治疗反应产生负面影响。鉴定赋予炎症表型的基因改变可能有助于开发涉及经典化学治疗剂和分子靶向化合物的联合药物方案，以提高疗效，例如本文报道的，在侵袭性乳腺癌中使用低剂量索拉非尼（Sorafenib）。微信扫描下方二维码了解更多：