达克替尼Dacomitinib联合IR治疗SCCHN的潜在作用

　　Dacomitinib在阻断所有三种SCCHN细胞系中的EGFR磷酸化方面非常有效，导致增殖减少、克隆形成减少，同时体外G1细胞周期停滞显着增加。这些发现在体内得到证实，因为达克替尼降低了EGFR磷酸化和肿瘤细胞增殖，导致肿瘤生长延迟。此外，达克替尼和IR之间的相互作用在体外是协同的，在体内是相加的。　　

　　EGFR通路的失调已在许多人类恶性肿瘤中得到充分证明。在SCCHN中，几乎所有肿瘤都存在EGFR过表达，其程度与对化疗和/或放疗的抵抗有关，导致生存率降低。据报道，SCCHN中其他ErbB受体的过度表达（ErbB2，3-29%；ErbB3，21%；ErbB4，26%），也可能导致疾病进展。在本研究评估的三个SCCHN细胞系中，EGFR均一地过度表达，但未观察到ErbB家族其他三个成员的基础表达增加。　　

　　抑制EGFR已被广泛研究用于治疗SCCHN，先前的报告得出结论认为EGFR是一个有吸引力的治疗靶点，为西妥昔单抗加放疗试验[14]提供了基本原理。然而，西妥昔单抗加放疗的临床反应虽然显着，但仍然温和，这促使人们寻找改进的治疗策略，例如泛ErbB抑制剂。事实上，这项评估达克替尼的研究证明了对EGFR磷酸化的显着剂量依赖性抑制。及其详细描述的下游介质：RAS/RAF/MEK/ERK和PI3K/AKT/mTOR通路。有趣的是，在调节细胞生长和凋亡中起关键作用的STAT3的激活在低剂量达克替尼(10nM)下显着降低，但似乎在更高剂量下被诱导。EGFR显然是一种已知的STAT3上游激活剂，通过SRC酪氨酸激酶的磷酸化。然而，通过白细胞介素6(IL-6)激活糖蛋白130(gp130)受体家族，也存在不依赖于EGFR的STAT3信号传导，如SCCHN细胞系所述。EGFR与STAT3抑制剂的组合在其他临床前模型中显示出改善的抗肿瘤活性；当然，当前研究的数据将支持对达克替尼与STAT3抑制剂联合治疗SCCHN的进一步研究。事实上，已经表明EGFR与SRC抑制剂的组合对SCCHN患者具有潜在益处。　　

　　鉴于放疗是SCCHN的主要治疗方式，我们检查了达克替尼对IR的影响；在体外始终表现出协同相互作用，以及体内的累加效应。单独的电离辐射可以通过增加EGFR或其配体TGF-α的表达来诱导EGFR活化，然后可能导致增殖反应。其他EGFR抑制剂已与IR联合使用，所有这些都一致支持这种抗肿瘤功效的组合策略。已经描述了多种抑制EGFR的放射致敏机制，包括细胞周期扰动、抑制DNA损伤修复以及抗血管生成作用[43]。我们目前的研究表明，用Dacomitinib治疗后G1细胞周期停滞的预期剂量依赖性增加，这与Ather等的研究结果一致。还观察到S期细胞比例相应减少，这是一个更抗辐射的阶段。Ki-67免疫表达的显着减少在体内证实了这一点。在三种细胞系中的两种（FaDu和UT-SCC-42a）中，Dacomitinib与IR的组合显示亚G1部分的增加，表明细胞凋亡增强。尽管这在异种移植模型中没有得到证实。这些结果与之前评估EGFR抑制剂与IR在其他SCCHN癌症模型中的作用的报告一致，支持达克替尼在包括IR在内的联合治疗方案中的适用性。　　

　　靶向EGFR的持续挑战之一是对当前EGFR抑制剂的内在或获得性耐药，这与多种机制有关。例如，增加的ErbB2和ErbB3激活可能来自西妥昔单抗治疗，这可能是获得性耐药的原因。这些研究确定了与旁路信号传导相关的耐药机制，其中尽管EGFR受到抑制，ErbB通路仍保持激活状态。因此，达克替尼不仅能有效抑制EGFR激酶活性，还能有效抑制ErbB2和ErbB4激酶活性，理论上应该可以消除这种绕过耐药机制。这已经证明，一旦将ErbB2和/或ErbB3抑制剂添加到西妥昔单抗中，西妥昔单抗抗性SCCHN细胞系就会重新对EGFR抑制敏感。　　

　　已显示EGFR的激活突变与其他人类恶性肿瘤中对EGFR抑制的反应相关。虽然一些突变可以赋予对EGFR靶向的敏感性，例如G719C和L858R突变，但其他如T790M突变实际上与耐药性相关。然而，这些突变在SCCHN中很少见，并且在本研究中使用的三种SCCHN细胞系中均未发现。也许SCCHN更具有临床相关性的突变可能是EGFR变异(vIII)突变，其中EGFR的细胞外配体结合域包含外显子2-7的框内缺失，使EGFR组成性激活。在大约40%的SCCHN患者中观察到EGFRvIII突变，这与化疗耐药和对西妥昔单抗反应的生长抑制降低有关。本研究中使用的所有三种SCCHN细胞系的EFGRvIII突变均为阴性（数据未显示）；尽管肯定有必要进一步研究以评估Dacomitinib在此类含有EGFRvIII突变的SCCHN模型中的疗效。　　

　　不断出现的数据将HPV相关的SCCHN描述为该疾病的一个独特亚型。临床上，HPV阳性SCCHN主要出现在口咽部，HPV阳性患者表现出更好的治疗反应率和改善的总体生存率和无病生存率。在这项研究中，我们的细胞系来源于下咽(FaDu)和喉(UT-SCC-8和UT-SCC-42a)SCC，并且都是HPV阴性的。在HPV阳性SCCHN模型中，应进一步研究达克替尼治疗的效果，无论是否有IR。然而，最近的证据表明，HPV致癌基因可能对SCCHN中的EGFR通路没有影响，并且抗EGFR治疗的反应可能与SCCHN患者的HPV状态无关。　　

　　总之，这项研究表明，达克替尼Dacomitinib是一种有效的抗增殖剂，可在体外和体内治疗SCCHN。Dacomitinib抑制EGFR磷酸化导致AKT、ERK和mTOR的下游信号减少，导致细胞活力和克隆存活率降低，并增加体外G1细胞周期停滞。Dacomitinib与IR的组合在体外具有协同细胞毒性。单独使用达克替尼的抗增殖作用在体内得到证实，以及与IR结合时的附加抗肿瘤功效，对正常组织没有明显的额外毒性。因此，这些数据强烈支持在SCCHN患者的早期研究中进一步评估达克替尼联合放疗。详情请扫码咨询：