卡博替尼(Cabozantinib)对骨微环境的直接作用

　　卡博替尼（Cabozantinib）是一种c-MET和血管内皮生长因子受体2抑制剂，被证明可延长去势抵抗性前列腺癌和转移性肾癌的无进展生存期并改善与骨骼疾病相关的终点。我们的目的是使用原代破骨细胞和成骨细胞的全人类模型研究卡博替尼对骨微环境的直接作用。

　　破骨细胞与从健康供体中分离出的单核细胞有区别；成骨细胞源自人间充质干细胞，其取自骨科手术患者的骨碎片。通过抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色和骨吸收测定来评估破骨细胞的活性，通过碱性磷酸酶和茜素红染色来检测成骨细胞的分化。

　　我们的结果表明，非细胞毒性剂量的卡博替尼显着抑制破骨细胞分化（p = 0.0145）和骨吸收活性（p = 0.0252）。此外，卡博替尼可下调破骨细胞标志物基因TRAP（p = 0.006），组织蛋白酶K（p = 0.004）和核因子k B受体激活剂（RANK）的表达（p = 0.001）。卡博替尼治疗对成骨细胞的生存能力或分化没有影响，但会增加骨保护素mRNA（p = 0.015）和蛋白质水平（p = 0.004），并下调核因子k B配体的受体激活剂（RANKL））在mRNA（p<0.001）和蛋白质水平（p = 0.043）上均显示。卡博替尼预处理的成骨细胞与未处理的破骨细胞之间的直接细胞间接触证实了卡博替尼的间接抗再吸收作用。

　　我们证明卡博替尼“直接”抑制“破骨细胞功能”，“间接”抑制成骨细胞中RANKL /骨保护素的比例。

　　卡博替尼是一种口服生物利用型酪氨酸激酶抑制剂，对促进肿瘤进展和血管生成的c-MET和血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）具有很强的活性。破骨细胞和成骨细胞也表达c-MET和VEGFR2 和分泌对c-MET，肝细胞生长因子（HGF）的唯一的已知配体，支承在骨重塑调节HGF / MET信号传导轴的重要性。

　　从临床前和临床证据开始，我们设计了一项体外/翻译研究，以研究卡博替尼在我们的人类原代成骨细胞/破骨细胞模型中的生物学作用。我们的结果表明，卡博替尼对破骨细胞的分化和骨吸收活性具有很强的抑制作用，而在给药剂量下不会产生任何细胞毒性作用。此外，卡博替尼能够下调关键破骨细胞基因如TRAP，CATHEPSIN K和RANK的mRNA表达。

　　卡博替尼不会抑制成骨细胞分化和骨基质沉积，但是，最有趣的是，我们观察到RANKL的下调伴随治疗后OPG水平的上调。因此，我们建立了成骨细胞/破骨细胞共培养（细胞间接触），以评估卡博替尼在更生理的系统中的作用。我们的结果表明，卡博替尼预处理的成骨细胞能够减少直接在成骨细胞层上分化的破骨细胞的数量。因此，卡博替尼可以在骨转移过程中发挥多种作用，靶向癌细胞，骨细胞和干扰肿瘤与骨微环境之间的串扰。特别是，卡博替尼治疗可能会中断成骨细胞，破骨细胞和肿瘤细胞之间的促肿瘤相互作用的``恶性循环''，从而抑制骨吸收并释放骨基质嵌入因子，进而刺激肿瘤细胞生长。此外，鉴于RANKL / OPG / RANK轴在骨转移形成中的众所周知作用，卡博替尼可抑制癌细胞归巢至骨位及其随后的增殖。

　　我们的体外结果提供了卡博替尼对成骨细胞和破骨细胞的潜在作用的证据，这是其在体内降低肿瘤负荷，延长骨骼PFS，减少新的骨转移发作和延迟SRE出现的体内功效的成分，如转移性前列腺癌所示。晚期肾癌的患者和最近的患者。

　　从临床角度看，这些结果可能代表了生物学原理，以便调查卡博替尼来设计新的临床试验小号的骨骼疾病相关的端点活动及其潜在的协同效应与标准的抗骨吸收药物患者的骨转移性实体肿瘤。微信扫描下方二维码了解更多：