INC280卡马替尼靶向cMET对胰腺癌细胞系生长的影响

　　在人胰腺癌细胞系中评估了cMET作为卡马替尼（INC280）靶标的表达。结果显示cMET在HPAF-II，BxPC3和L3.6pl细胞中表达，而MiaPaCa2未显示可检测的表达。接下来，在体外确定用卡马替尼靶向cMET对胰腺癌细胞系生长的影响。使用MTT分析时，仅当用HGF刺激细胞时才发现对HPAF-II的轻微但显着的剂量依赖性生长抑制。随后，迁移分析表明cMET阻断可显着损害HGF诱导的运动，但对HPAF-II细胞的组成性迁移没有影响。

　　我们确定了卡马替尼对致癌信号通路激活的影响。HPAF-II细胞与卡马替尼一起孵育4小时或24小时不会影响Akt，ERK或FAK的组成型磷酸化。尽管在这些条件下未观察到组成性cMET磷酸化，但用HGF刺激15分钟会导致cMET，Akt，ERK和FAK磷酸化。用INC280进行的预处理完全消除了这种影响。

　　随后在L3.6p1人胰腺癌细胞系中证实了所描述的观察结果。在L3.6p1中未检测到FAK磷酸化，因此未显示。另外，我们使用鼠胰腺癌细胞系Panc02来证实这些结果。总之，我们的结果表明，与卡马替尼治疗有效消除了HGF诱导的运动性和致癌信号在胰腺癌细胞系在体外。

　　我们分析了卡马替尼对VSMC的影响。MTT分析显示，孵育72小时后，从卡马替尼（100nM）开始对VSMC的生长具有剂量依赖性。与EC相比，在血清饥饿的条件下用HGF刺激对VSMC生长无影响，因此，卡马替尼在MTT分析中没有进一步的生长抑制作用。在HSMC中与HGF一起孵育时未诱导出运动性，但是将卡马替尼靶向cMET导致对组成性迁移的显着抑制。最终，蛋白质印迹法未显示INC280对Akt组成型Akt磷酸化有实质性影响，而对VSMC中ERK磷酸化的影响很小。这些结果表明，HGF不会影响VSMC，卡马替尼不会抑制cMET，因此对这些细胞的影响很小。

　　我们无法在Panc02模型中检查肝转移，因为根据我们的经验，这些细胞不会形成肝转移。应该注意的是，用卡马替尼治疗的小鼠均未显示腹水形成。总之，这些结果清楚地表明，以卡马替尼靶向cMET会损害肿瘤的生长和体内转移。因此我们接下来探讨了卡马替尼与吉西他滨在体内联合使用的问题。根据患者的情况，我们首先定义了吉西他滨的剂量，使用皮下同基因肿瘤模型仅具有有限的治疗功效。现在卡马替尼的效果也还是比较不错，更多详情可咨询下方微信。