INC280卡马替尼在耐厄洛替尼的NSCLC细胞系中作用

　　作为单一药物，厄洛替尼可有效下调EGFR突变及其细胞株HCC827和PC-9中EGFR及其下游信号传导介质的磷酸化，包括停靠蛋白GAB1，AKT和ERK。EGFR/ KRAS野生型细胞系H1666对EGFR的抑制主要导致MEK / ERK下调。尽管MET蛋白通常在NSCLC中表达，但我们在细胞系中仅观察到有限的MET磷酸化。唯一的例外是细胞系HCC827，其中观察到了卡马替尼（INC280）基础磷酸化，第一个面板。

　　但是它似乎依赖于EGFR，因此用埃洛替尼治疗可消除EGFR磷酸化，也可去除MET磷酸化。用HGF刺激后，在所研究的3种细胞系中阻止了厄洛替尼诱导的信号转导活性抑制。在这种情况下，以0.1μM的剂量进行卡马替尼处理可逆转此效应，从而有效消除GAB1，AKT和ERK的磷酸化。重要的是，在没有厄洛替尼治疗的细胞系中，卡马替尼不足以敲除信号传导（直接靶向MET磷酸化之外）。此外，通过对caspase-3和PARP的切割评估，在我们的细胞系中，卡马替尼处理恢复了厄洛替尼观察到的细胞毒性。

　　治疗24小时后的免疫印迹分析。用含或不含HGF（50 ng / mL）的厄洛替尼（0.5μM）和卡马替尼（0.1μM）处理细胞。总和磷酸化的EGFR，MET，GAB1，AKT和ERK的表达。PARP切割和切割的Caspase-3的分析。用较低剂量的厄洛替尼（0.05μM）处理HCC827和PC-9细胞

　　MET活化促进的EGFR TKI耐药性已被充分证明，其特征为MET拷贝数异常或HGF产生升高。HGF表达已经显示到可逆的和不可逆的EGFR TKI的中介电阻以及在NSCLC细胞中的单克隆抗体西妥昔单抗。在这里，我们表明使用口服生物可用的MET抑制剂卡马替尼抑制MET信号传导可以在我们的获得性耐药模型中恢复对厄洛替尼的敏感性。重要的是，我们利用HGF刺激来模拟MET介导的对厄洛替尼的获得性耐药。这些结果与先前关于HGF-MET轴在介导NSCLC中厄洛替尼耐药性中作用的报道一致。现在卡马替尼的效果也还是比较不错，更多详情可咨询下方微信。