一项最新研究调查了MEK抑制剂在KRAS突变的癌细胞中的不同功效，其中ERK途径活化可能是CRAF介导的。该研究表明，两种MEK抑制剂在持续抑制CRAF介导的ERK活性方面不如曲美替尼（）有效。该结果可以解释为什么H1666和H508细胞对曲美替尼（mekinist）的敏感性高于对司美替尼的敏感性，因为与KRAS突变的细胞类似，这些细胞系中的BRAF突变以CRAF依赖性的方式激活ERK途径。与此相反，H1666先前报道为对PD0325901，这是机械上类似于司美替尼，通过了制备抑制MEK容易再活化通过CRAF 。因此，进一步研究各种MEK抑制剂在BRAF突变的癌症中的比较功效将有助于解释这些矛盾的结果。
已知受损的BRAF激酶突变会与CRAF发生二聚并变构地激活它，从而导致ERK途径激活。因此，我们评估了在存在CRAF的情况下，各种BRAF突变对ERK信号传导的影响。与受损的激酶活性和CRAF共同表达的BRAF突变体强烈增加了MEK和ERK的磷酸化。与wt-BRAF / CRAF共转染子相比，共表达BRAF突变体且激酶活性和CRAF受损的HEK293细胞中的ERK活性更高。
唯一的例外是D594V BRAF突变体，因为它与CRAF的共表达导致MEK和ERK活性适度增加。该结果与先前在另一种细胞模型中的报告一致。这些结果表明，D594V BRAF可能是非致病性变异体，也可能是激酶非依赖性癌基因。而CRAF的非小细胞肺癌中的作用还没有被完全阐明，CRAF过表达已经报道在肺癌。在转基因小鼠模型中，针对肺的CRAF过度表达可以诱导NSCLC的发展。在具有KRAS突变的癌症，CRAF起着ERK信号和在肿瘤发生的[早期阶段中起关键作用。CRAF敲低已显示抑制具有BRAF突变的NSCLC细胞的生长，这些突变赋予激酶活性受损。
在单表达外源CRAF的细胞中，以及在共表达外源wt-BRAF和CRAF的细胞中，观察到了达拉非尼诱导的悖论性ERK活化。该结果与RAF抑制剂诱导的反常ERK活化的CRAF依赖性的报道一致。与达拉非尼不同，MEK抑制剂曲美替尼不会在CRAF单转染子中诱导ERK激活。在HEK293T细胞中，曲美替尼会适度降低BRAF突变诱导的ERK活性，从而赋予激酶活性升高，同时强烈抑制激酶受损的BRAF / CRAF诱导的ERK活化。此外，我们显示，曲美替尼和达拉非尼的联合治疗克服了wt-BRAF / CRAF HEK293T和肺上皮共转染子中悖论性的ERK活化，并显着改善了非V600 BRAF突变体的ERK抑制，同时激酶活性受损和升高。
丝氨酸338是CRAF的N-区中的调节位点，其磷酸化被认为是CRAF活化的初步步骤。然而，确切的机制和之前和之后CRAF激活事件的全序列在很大程度上仍然未知。RAF抑制剂的两个类已经显示出诱导CRAF的磷酸化在S338。我们还观察到了达拉非尼的类似现象。
值得注意的是，活化的CRAF被认为与几种与肿瘤发生有关的激酶非依赖性功能有关。因此，尚待确定活化的CRAF是否能随着时间的流逝而促进BRAF突变的癌症中对RAF抑制剂的激酶非依赖性耐药机制。在所有测试的细胞系中，与单药治疗相比，联合治疗可增强和延长ERK抑制时间（48小时）。与在V600突变的细胞中一样，该结果表明联合RAF和MEK靶向可以克服非V600 BRAF突变的细胞对RAF抑制剂单药治疗的早期适应性不敏感性。
有趣的是，H1666和H508细胞系先前证明是耐-或响应到不良选择性RAF抑制剂威罗菲尼，以及向所述MEK抑制剂司美替尼。由于给定细胞系中的ERK激活是CRAF介导的，所以维拉非尼是弱CRAF抑制剂这一事实可能有助于差异反应。值得注意的是，CRAF敲低已显示抑制H1666细胞的生长。
由于我们的患者队列较小，因此我们无法检测到BRAF突变的肺癌与其他分子亚型之间或不同的BRAF突变类型之间存在任何显着的临床差异。总之，我们的发现证实了非V600 BRAF突变在NSCLC中并不罕见。我们证明非V600 BRAF突变会导致高或受损的激酶活性，赋予达拉非尼和曲美替尼联合治疗敏感性。达拉非尼单药疗法仅具有较弱的作用，仅用达拉非尼靶向受损的BRAF突变突变或CRAF过表达的细胞甚至可能导致悖论性ERK活化。值得注意的是，以前没有描述过赋予突变激酶活性的细胞对达拉非尼和曲美替尼联合治疗的敏感性。我们的研究结果支持达拉非尼-曲美替尼联合治疗在其肿瘤中携带非V600 BRAF突变的晚期NSCLC患者中的疗效的临床探索。现在曲美替尼价格是多少？更多详情可咨询下方微信。
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