曲美替尼Trametinib作为单一药物对BRAF突变的细胞有效

　　V-Raf鼠肉瘤病毒癌基因同源B(BRAF)突变肺癌具有相对的侵袭性，对目前可用的治疗方法具有耐药性。在最近的一项针对BRAF-V600E非小细胞肺癌(NSCLC)患者的II期研究中，BRAFV600E抑制剂显示了活性证据，但该组30%的患者在治疗期间进展，提示有必要制定替代策略。　　

　　我们测试了两种不同的选择来增强vemurafenib(BRAFV600E抑制剂)对BRAF突变的NSCLC的疗效。第一种选择是在vemurafenib中加入厄洛替尼，以观察联合用药是否有协同作用。第二种是用MEK抑制剂曲美替尼诱导MEK抑制(RAF下游)。　

　　我们发现vemurafenib和厄洛替尼联合使用对BRAF-V600E细胞中p-ERK信号的抑制没有协同作用。Vemurafenib诱导BRAF-V600细胞凋亡，G1阻滞，BIM上调。曲美替尼作为单一药物对BRAF突变的细胞有效，无论是V600E还是非V600E。最后，与单药相比，vemurafenib和trametinib联合使用导致细胞凋亡的轻微但显著增加，以及BIM的显著上调。　　

　　因此，暗示了利用联合方法来管理这一组患者的可能性。重要的是，单用曲美替尼可引起BRAF非v600突变细胞中p-AKT的上调，而联合使用则使这一效应失效。这一发现表明，在BRAF突变的NSCLC患者中，联合使用MEK抑制剂和BRAF抑制剂将更有效。　　

　　BRAF突变型NSCLC被认为具有侵袭性，并对目前可用的治疗方法表现出耐药性。Vemurafenib是一种针对V600E突变的口服BRAF抑制剂，已被证明对具有相同突变的晚期黑色素瘤患者有效。有证据支持BRAF抑制剂单独用于BRAF-v600e阳性突变的非小细胞肺癌，在治疗时，只有适度的获益，没有完全缓解，40%的部分缓解，30%的疾病进展。　　

　　MEK(MAPK/ERK激酶)抑制在BRAF突变型NSCLC中的作用尚未被彻底研究，最近的一项研究表明，BRAF抑制剂(dabrafenib)和MEK抑制剂(曲美替尼)联合治疗晚期黑素瘤也有效。Trametinib是一个口头可用MEK抑制剂最近食品和药物管理局(FDA)批准用于治疗转移性黑色素瘤患者BRAF-V600EBRAF-V600K突变，基于临床试验的结果Flahertyetal.，显示显著效益发展自由和总生存期。　　

　　在临床前，受体酪氨酸激酶(RTK)抑制对磷酸肌醇3-激酶(PI3K)信号通路的抑制起主导作用。KRAS突变细胞系耐RTK抑制的机制之一是通过激活RAS信号通路。BRAFV600E突变的结肠癌细胞系通过激活上皮生长因子受体(EGFR)逃脱了vemurafenib的抑制；然而，用vemurafenib和EGFR抑制剂治疗这些细胞可以防止vemurafenib耐药性和诱导凋亡。　　

　　我们假设，BRAF通路的突变导致ERK的过度激活，因此，结合EGFR抑制和BRAF抑制将是有益的。我们还着手确定MEK抑制剂曲美替尼是否能使BRAF突变野生型(WT)EGFRNSCLC细胞对vemurafenib的BRAF抑制敏感。我们推测，由于MAPK通路的激活，BRAF-v600e细胞对BRAF抑制剂的敏感性有限。因此，曲美替尼可以增强BRAF抑制剂对BRAF突变的NSCLC的疗效。BRAF抑制剂的耐药性是通过多种机制介导的，诱导MAPK通路的重新激活。曲美替尼以MEK为靶点，而MEK是BRAF在MAPK通路中的下游。　　

　　因此，曲美替尼与BRAF抑制剂vemurafenib或dabrafenib联合使用会更有效。我们的目的是研究曲美替尼和vemurafenib是否能共同抑制BRAF突变型NSCLC细胞株中的ERK/MAPK信号通路。我们比较了单药vemurafenib或曲美替尼Trametinib与vemurafenib联合曲美替尼对BRAF突变的NSCLC细胞株HCC364[V600E-BRAF，WTEGFR]和H1755[non-V600E，G469ABRAF突变株，WTEGFR]的疗效。详情请扫码咨询：