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阿法替尼afatinib对血小板活化和凋亡的抑制作用

时间:2022-01-18 14:42 来源:康安途 作者:康安途海外就医

  背景/目的:表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶抑制剂阿法替尼afatinib用于治疗多种恶性肿瘤。阿法替尼afatinib通过触发肿瘤细胞的凋亡至少部分有效。血小板可以类似地经历细胞凋亡,其特征在于半胱天冬酶3活化、细胞收缩和磷脂酰丝氨酸易位。然而,从未报道过阿法替尼afatinib对血小板的影响。本研究探讨了在血小板活化剂凝血酶或胶原相关肽(CRP)不存在和存在的情况下,用阿法替尼afatinib治疗血小板是否会改变血小板活化和细胞凋亡。

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  方法:从野生型小鼠中分离的血小板暴露于阿法替尼afatinib(18μg/ml)30分钟,没有或随后用凝血酶(0.005U/ml或0.01U/ml)或CRP(2μg/ml或5μg)治疗/毫升)。流式细胞术用于用特异性抗体估计血小板表面的Orai1丰度,来自Fluo-3荧光的细胞溶质Ca2+-活性([Ca2+]i),来自P-选择素丰度的血小板脱粒,来自αIIbβ3整合素丰度的整合素激活,利用半胱天冬酶活性活性Caspase-3染色试剂盒,来自膜联蛋白-V结合的磷脂酰丝氨酸丰度,来自前向散射的血小板体积和利用CD9-APC和CD9-PE染色的聚集。  

  结果:在没有凝血酶和CRP的情况下,给予阿法替尼afatinib(18μg/ml)轻微但显着增加[Ca2+]i和膜联蛋白-V结合,但没有显着改变Orai1丰度、P-选择素丰度、活化的αIIbβ3整合素、细胞体积、半胱天冬酶活性和聚集。血小板暴露于0.005U/ml或0.01U/ml凝血酶或2μg/ml或5μg/mlCRP后,Orai1丰度显着增加,[Ca2+]i增加,P-选择素丰度,αIIbβ3整合素活性、膜联蛋白-V结合、半胱天冬酶活性和聚集,以及前向散射显着降低,阿法替尼afatinib使所有效应显着减弱(凝血酶)或几乎消除(CRP)。 

  结论:阿法替尼afatinib是血小板活化、血小板凋亡和血小板聚集的强效抑制剂。详情请扫码咨询:

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(责任编辑:康安途海外就医)

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