依鲁替尼ibrutinib抑制间充质干细胞介导的弥漫性大B细胞淋巴瘤耐药

　　目的：探讨依鲁替尼对耐药弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）细胞的作用机制。　

　　方法：DLBCL细胞系与间充质干细胞（MSC）一起培养，显微镜下对迁移并粘附在MSC上的DLBCL细胞进行计数。通过ELISA测量MSC分泌的CXCL12。通过流式细胞术测量DLBCL细胞上CXCR4的表达，用CXCR4-慢载体转染HBL-1细胞。膜联蛋白Ⅴ结合试验用于检测细胞凋亡的诱导。在MethoCult培养基上评估DLBCL细胞的克隆生长。将依鲁替尼注射到NOD/SCID小鼠中，每3天通过卡尺测量评估肿瘤生长。　　

　　结果：MSC促进DLBCL细胞向MSC的迁移和粘附。依鲁替尼以剂量依赖性方式抑制DLBCL细胞向MSC的迁移和粘附（P<0.05）。MSC分泌的CXCL12和在DLBCL细胞上表达的CXCR4可以相互诱导，从而提高分泌和表达水平。依鲁替尼可抑制CXCL12的分泌（SUDHL10：660pg/mlvs1400pg/ml，P=0.004；HBL-1：720pg/mlvs1490pg/ml，P=0.018；DLBCL：850pg/mlvs1450pg/ml,P=0.004)和CXCR4的表达(P<0.05)。与MSC共培养时，对照组、米托蒽醌、依鲁替尼、米托蒽醌+依鲁替尼组HBL-1细胞凋亡率分别为15.1%、17.5%、23.5%、58.7%。转染CXCR4慢载体并过表达CXCR4后，HBL-1细胞凋亡率分别为14.2%、16.1%、22.5%、38.3%。与MSC共培养时，米托蒽醌诱导的DLBCL细胞凋亡率较低（P<0.05)。但加入依鲁替尼后，细胞凋亡率增加，与无间充质干细胞培养相似，提示依鲁替尼可抑制间充质干细胞诱导的耐药。但转染CXCR4-lentivector后，检测到CXCR4过表达，与MSC共培养时细胞凋亡率显着降低，说明依鲁替尼通过抑制CXCR4的表达来抑制耐药性。MSC增强体外淋巴瘤克隆形成和体内淋巴瘤细胞生长。对照组、MSC、依鲁替尼、MSC+依鲁替尼的菌落数分别为113±5、205±4、62±9、123±3（2.5×10（3）/孔，x±s），分别。NOD/SCID小鼠的肿瘤体积分别为6500、17000、4000、10000mm。依罗替尼抑制淋巴瘤克隆发生在体外和淋巴瘤的细胞生长的体外。　　

　　结论：依鲁替尼靶向CXCL12/CXCR4轴，抑制CXCR4的表达，抑制MSC介导的耐药性。依鲁替尼还在体外抑制淋巴瘤克隆形成和体内淋巴瘤细胞生长。这些结果为依鲁替尼ibrutinib治疗复发/难治性DLBCL提供了科学合理性。详情请扫码咨询：