米哚妥林(midostauin)对激活和生长的显著影响

　　基于蛋白质组学的药物检测是一种新兴的方法来确定多激酶抑制剂的临床价值和抗肿瘤潜力。多激酶抑制剂米哚妥林（midostauin）是一种很有前途的新药物，用于治疗晚期系统性肥大细胞增多症(SM)患者。我们检测了两种药理学相关的米多菌素代谢物CGP52421和CGP62221的靶标相互作用谱和肥大细胞(MC)靶向效应。米哚妥林（midostauin）和两种代谢物均能抑制嗜碱性粒细胞和MC中ige依赖的组胺分泌，其IC50值合理。米哚妥林（midostauin）和CGP62221在MC白血病细胞系HMC-1.2中也产生了KIT的生长抑制和去磷酸化作用，而在体内积累的第二代谢物CGP52421对KIT没有明显的作用。化学蛋白质组分析和药物竞争实验表明，米多餐厅素与KIT和其他几个激酶靶点相互作用。在MC裂解物中，关键下游调控因子FES被midostauin和CGP62221识别，而CGP52421不识别，而ige受体下游靶标SYK被这两种代谢产物识别。总之，我们的数据显示，临床相关的米哚妥林代谢物CGP52421可抑制ige依赖的组胺释放，但对MC增殖具有较弱的抑制作用，这可能具有临床意义，并可能解释为什么SM患者即使在疾病进展时，中介相关症状也会改善。

　　在晚期SM中，患者通常会出现介质相关症状以及局部MC浸润造成的器官损害(1 - 3,12 - 14)。在过去的几年中，一些有前景的新药已经被开发出来并在临床前研究中进行了测试，这些新药有可能作为ASM和MCL的细胞还原剂。其中一种药物是多激酶阻滞剂米哚妥林（midostauin）。然而，尽管介质相关症状经常改善，血液反应通常是短暂的(20,24,30)。其中一些患者复发为KIT d816v阴性疾病(20)。我们检测了两种药理学上相关的米多菌素代谢物CGP52421和CGP62221对MC增殖、存活和ige依赖性介质分泌的影响。我们发现这3种药物都能抑制ige依赖性组胺释放。然而，虽然米哚妥林（midostauin）和CGP62221抑制了肿瘤性MC的生长，但在体内积累的第二代谢物CGP52421对MC的生长和存活仅表现出微弱或无影响，这可能与临床有关。

　　米哚妥林（midostauin）患者在治疗过程中产生了两个药理学相关的代谢物CGP52421和CGP62221(33-37)。CGP62221的非线性药代动力学与米哚妥林（midostauin）的模式相同，而第二代谢物CGP52421在每日治疗一个月后随时间上升，直到达到稳定的浓度(33-37)。我们的数据显示，与米哚妥林（midostauin）相比，CGP52421在肿瘤性MC中产生生长抑制和凋亡的效果较差。相比之下，另一种代谢物CGP62221对肿瘤MC表现出几乎相同的生长抑制作用。这是特别有趣的，因为MC在初级样本中的百分比在供体之间是不同的，即使大多数非MC系细胞在高级SM表达KIT D816V中，与其他(克隆)细胞类型相比，对TKI的响应可能是不同的。另一方面，IC50值在供体之间具有可比性，在那些绝大多数细胞为MC的样本中也可以看到响应。在患者中，由于CGP52421获得的曝光度比米哚妥林（midostauin）高5 - 7倍，临床上一个重要的问题是，这种代谢物是否会成为米多斯汀的竞争对手。然而，我们的数据显示，CGP52421对midostaur诱导的肿瘤性MC的生长抑制没有影响。

　　我们接下来问米多胺的哪些靶点可能会阻断MC和嗜碱性粒细胞中的组胺释放。我们发现这些化合物可以识别SYK、PDK1、TBK1或PKN1等几个不同的靶标。其中SYK被鉴定为介导组胺分泌的重要功能靶点。事实上，在HMC-1.2细胞中，midostauin及其代谢物被发现下调syk -磷酸化。此外，我们能够证明syk抑制与减少组胺释放有关。总之，这些数据表明SYK是米哚妥林（midostauin）在MC和嗜碱性细胞中的一个相关靶点。

　　米哚妥林（midostauin）和cladribine (2CdA)均可抑制ASM或MCL患者肿瘤性MC的生长(20,21,24,46,48)。以往的数据显示，两种药物联合使用时，在体外对肿瘤MC具有生长抑制作用。在本研究中，我们询问了当与米多斯汀代谢物联合使用时，2CdA是否也会产生协同生长抑制作用。我们的结果表明，这两种代谢物均与2CdA协同作用，在HMC-1.2细胞中产生生长抑制作用，这将有利于midostin与2CdA联合治疗晚期SM的临床试验。

　　综上所述，我们的数据显示，在体内积累的与midostin相关的药理学代谢物CGP52421对肿瘤性MC几乎没有抑制作用，但保留了组胺释放阻断活性。这些观察结果可以解释为什么即使没有获得血液学上的缓解，米哚妥林（midostauin）治疗的患者中介体相关症状也会改善。微信扫描下方二维码了解更多：