多吉美/索拉非尼和尼罗替尼组合可减少前列腺癌的生长

　　由于缺乏有效的治疗方法，去势抵抗性前列腺癌 (CRPC) 仍然无法治愈。几种酪氨酸激酶与 CRPC 的发展和生长有关，因此靶向这些激酶可能提供替代治疗策略。我们确定了两种酪氨酸激酶抑制剂 (TKIs) 的组合，多吉美/索拉非尼和尼罗替尼，作为最具细胞毒性的药物。在addtion，提高其生物利用度，降低其新陈代谢，我们封装索拉非尼和尼罗替尼为苯乙烯共-马来酸胶束。表征了胶束的电荷、大小和释放速率。我们评估了组合对细胞毒性、细胞周期、细胞凋亡、蛋白质表达、肿瘤球体完整性、迁移和侵袭的影响。胶束的平均直径为 100 nm，带中性电荷，表现出高度稳定。与游离 TKI 相比，胶束 TKI 促进了更大的细胞毒性，减少了细胞增殖，并增加了细胞凋亡。此外，该组合比单一治疗更有效地降低了几种酪氨酸激酶的表达和活性，并更有效地降低了 CRPC 细胞系的肿瘤球体完整性和转移潜力。该组合增加了治疗潜力，并证明了靶向联合治疗与 CRPC 治疗的相关性。

　　尽管出现了新疗法，但 CRPC 仍然是一个重要的健康挑战。新的治疗方法包括化疗药物，如多西他赛和卡巴他赛，基于树突细胞的疫苗如 sipuleucel-T，骨靶向放射性药物如镭 223，以及干扰雄激素刺激肿瘤生长的化合物，如 AR 拮抗剂（恩杂鲁胺） ）或雄激素合成抑制剂（阿比特龙）。对于 mCRPC，建议无限期地继续雄激素剥夺。在 30% 的复发性肿瘤 CRPC 患者中观察到 AR 扩增，但在 ADT 之前取自同一患者的组织中未观察到 AR 扩增。醋酸阿比特龙/泼尼松、恩杂鲁胺、镭 223 和多西他赛/泼尼松等治疗改善了患者的生存率和患者的生活质量，而多西他赛/泼尼松的毒性中等。对于无症状或症状轻微的男性，sipuleucel-T 提高了患者的生存率。对于某些疗法，这些新疗法已将患者的总生存期从 6-10 个月缩短至 24 个月。尽管有这些临床改进，但很明显还需要进一步的治疗进展。最近的研究表明，CRPC 的进展和对当前治疗的耐药性的发展与酪氨酸激酶信号传导的活性增加有关。然而，与其他癌症类型相反，在 CRPC 患者中很少发现体细胞突变或酪氨酸激酶基因扩增。缺乏突变也表明肿瘤不会沉迷于显性信号通路，并且可能在对特定抑制剂的反应中促进肿瘤间和肿瘤内异质性。近年来，人们对 RTK 在前列腺癌发展中所起重要作用的理解取得了进展，因此在临床试验中对各种 TKI 进行了评估。然而，将 TKI 用作单一治疗的结果令人失望。因此，更有希望的策略是将它们与其他 TKI 或化疗药物联合使用。

　　我们已经证明多吉美/索拉非尼和尼罗替尼这两种 TKI 的组合对 PC3 细胞产生最大的细胞毒性。然而，这两种 TKI 都是高度疏水的，这大大削弱了它们的体内生物利用度。本研究中开发的纳米粒子具有大约 100 nm 的相似尺寸和接近中性的电荷，并且 SMA-Sor 和 SMA-Nilo 的负载达到~16%。胶束的大小和电荷是考虑延长循环半衰期和理想生物分布的重要参数。从循环中消除纳米颗粒主要由肾脏和 RES 介导。流体动力学尺寸大于 5.5 nm 的纳米颗粒逃逸肾清除率，而 100 nm 或更小的尺寸则不太可能被 RES 识别和消除。此外，胶束的近中性电荷减少了其调理作用和 RES 的识别，有助于延长血液循环中的存在。因此，将这些药物封装在 SMA 胶束中可以提高它们的溶解度，同时也会降低代谢，提高生物利用度，降低对周围组织的毒性，并促进在肿瘤中的积累。

　　我们发现多吉美/索拉非尼和尼罗替尼在 PC3 细胞中适度降低细胞活力并增加细胞凋亡，在雄激素敏感性 LNCaP 细胞中强烈。两种药物的组合增强了细胞毒作用，而在所有治疗条件下，药物的包封会引发更深刻的细胞毒作用。多吉美/索拉非尼或尼罗替尼治疗促进的细胞毒性取决于它们的细胞内浓度。索拉非尼通过有机阳离子转运蛋白-1 和-3 以及有机阴离子转运多肽转运至肝细胞。这些转运体中CRPC肿瘤和细胞系，包括PC3和LNCaP细胞中表达。然而，没有发现尼罗替尼的转运蛋白，表明它是被动转运穿过细胞膜。索拉非尼和尼罗替尼的细胞外排机制已在多项研究中报道，仅涉及索拉非尼的乳腺癌耐药蛋白 (BCRP)、P-糖蛋白 (P-gp) 和多药耐药蛋白 (MRP)-2。有趣的是，虽然在这些细胞系中没有报道 P-gp 的基础表达，但用化学治疗剂治疗可能会诱导 P-gp 蛋白的表达。另一方面，BRCP 显示在两种细胞系中都表达，而 MRP-2 仅在 PC3 细胞中发现。尽管靶向蛋白质存在冗余，但联合治疗后细胞毒性增加的一种可能解释是，小 TKI 也是这些外排泵的已知抑制剂。尼罗替尼已被鉴定为 P-gp 和 BCRP 蛋白活性的抑制剂，而索拉非尼可降低 P-gp 蛋白的表达。联合治疗后观察到的较高细胞毒性可能是抑制药物外排的结果。

　　总之，我们提供了对多吉美/索拉非尼和尼罗替尼胶束组合在两种 CRPC 细胞模型中的分子反应的见解。此外，我们证明了多种 TKI 联合治疗的明显增强的细胞毒性作用，这可能提供一种克服单一治疗逃避治疗的方法。微信扫描下方二维码了解更多：