尼达尼布(Nintedanib)对肺纤维化的影响

　　特发性肺纤维化 (IPF) 是一种致命的间质性肺病。肺上皮的重复损伤和重编程被认为是疾病进展的关键驱动因素，导致成纤维细胞活化、细胞外基质重塑以及随后肺结构和功能的丧失。迄今为止，吡非尼酮和尼达尼布（Nintedanib）是已知可减缓疾病进展的唯一获批药物，然而，这些药物是否以及如何影响肺上皮细胞功能，在很大程度上仍未得到探索。

　　方法

　　我们用吡非尼酮或尼达尼布处理小鼠和人类 3D 离体肺组织培养物（3D-LTC；从精确切割的肺切片 (PCLS) 生成）以及原代小鼠肺泡上皮 II 型 (pmATII) 细胞。鼠 3D-LTC 或 pmATII 细胞源自纤维化的博莱霉素模型。促纤维化因子的混合物在人类 3D-LTC 中诱导了早期纤维化变化。通过 qPCR、蛋白质印迹、免疫荧光染色和 ELISA 确定上皮和间充质细胞功能。

　　结果

　　低 μM 浓度的尼达尼布 (1 μM) 和 mM 浓度的吡非尼酮 (2.5 mM) 降低了小鼠和人类 3D-LTC 以及 pmATII 细胞中纤维化基因的表达，包括胶原蛋白 1a1和纤连蛋白。值得注意的是，尼达尼布稳定了远端肺上皮细胞标志物的表达，尤其是 pmATII 细胞以及鼠和人类 3D-LTC 中的表面活性剂蛋白 C。

　　结论

　　吡非尼酮和尼达尼布（Nintedanib）对鼠和人上皮细胞表现出不同的作用，这可能有助于它们的抗纤维化作用。人类 3D-LTC 是评估治疗 IPF 患者的潜在药物的抗纤维化机制的宝贵工具。

　　IPF 是一种破坏性的间质性肺病，可逐渐导致肺破坏和肺功能丧失。治疗选择有限，与安慰剂治疗的患者相比，两种已获批准的药物吡非尼酮和尼达尼布可减缓肺功能的丧失。迄今为止，还没有对活的人类肺组织进行研究，因此我们对它们在人类中的作用方式的了解有限。对尼达尼布和吡非尼酮的潜在人类靶细胞和靶蛋白的更深入和更全面的了解可能有助于选择哪些患者对哪种治疗反应更好，并可能进一步允许开发更具体的新药。同时减少脱靶和副作用。3D-LTC 正在成为一种潜在的新型模型，可用于将临床前数据与临床数据联系起来。在这里，我们首次报告了 Pirfenidone 和 Nintedanib 在离体小鼠和人纤维化 3D-LTC 中的抗纤维化活性，并探讨了 Nintedanib 和 Pirfenidone 对肺泡上皮细胞的影响。

　　肺泡上皮的重复损伤是 IPF 发展的主要病理机制。ATII 细胞的异常反应已被证明有助于受损的修复和再生过程。然而，新型治疗剂的开发主要集中在针对增加的 ECM 产生和成纤维细胞积累。最近的几项研究强调了针对肺纤维化中异常上皮细胞反应的适用性和有效性 。迄今为止，关于吡非尼酮和尼达尼布的大多数机制研究都是在成纤维细胞上进行的。迄今为止，我们对尼达尼布和吡非尼酮如何影响肺中其他细胞类型的自然 3D 组成（包括上皮细胞）知之甚少。之前有证据表明尼达尼布会降低血管内皮细胞的增殖 。发现吡非尼酮抑制微粒的脱落，而尼达尼布增加了人肺上皮细胞系中 SP-D 的表达，然而，这些研究使用了超生理浓度的药物，因此对解释这些结果感到担忧在这些药物如何在患者中发挥作用的背景下。最近的两份报告表明，尼达尼布可抑制卵巢癌细胞中的 EMT，同时增加 E-钙粘蛋白水平。与这些观察结果一致，在我们的研究中，我们一致发现尼达尼布可改善功能性肺泡上皮细胞标志物，例如 SP-C。这些数据表明，恢复正常肺泡上皮细胞功能可能有助于尼达尼布的抗纤维化作用。未来需要使用相关体内模型进行研究，以进一步调查和证明潜在的因果关系。

　　总之，我们报告说尼达尼布（Nintedanib）而不是吡非尼酮治疗对体外和离体不同肺泡上皮细胞类型的一系列表型标志物产生积极影响，可能有助于其抗纤维化活性。此外，我们证明尼达尼布在使用人体组织的 IPF 离体模型中表现出抗纤维化活性，进一步验证了该模型可用于临床前研究。微信扫描下方二维码了解更多：