尼达尼布(Nintedanib)在体外和体内抑制淋巴管生成

　　研究尼达尼布（Nintedanib）在体外抑制淋巴管内皮细胞 (LEC) 诱导的淋巴管生成和体内炎症性角膜淋巴管生成的可行性。

　　使用甲基噻唑基二苯基溴化四唑 (MTT) 试验、transwell 系统和管形成试验来评估尼达尼布对血管内皮生长因子-C (VEGF-C) 刺激的 LEC 增殖、迁移和管形成的影响，碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF) 或血小板衍生生长因子-BB (PDGF-BB)。缝合诱导的角膜新生血管形成的小鼠模型用于评估尼达尼布通过全身和局部应用的抗血管生成和抗淋巴管生成作用。用淋巴管内皮透明质酸受体-1 (LYVE-1) 和 CD31 染色角膜扁平物，并对受累血管和淋巴管的区域进行形态测量分析。角膜冷冻切片用 F4/80 染色以评估炎症细胞募集。

　　结果

　　我们观察到，分别给予 VEGF-C、PDGF-BB 和 bFGF，LEC 增殖、迁移和管形成的作用显着增强，而尼达尼布则减弱了这种作用。尼达尼布的局部和全身应用均抑制了鼠角膜中缝合诱导的血管生成和淋巴管生成。对于 nintedanib 的全身和局部应用，在角膜缝合后第 14 天观察到F4/80+细胞浸润减少。与对照组相比，61% 的 F4/80+细胞募集被尼达尼布的全身应用抑制，而 F4/80+细胞募集的49%被尼达尼布的局部应用抑制。

　　结论

　　尼达尼布（Nintedanib）被证明可抑制由 VEGF-C、bFGF 和 PDGF-BB 刺激的体外淋巴管生成。局部或全身应用，它有效地抑制了角膜血管生成和淋巴管生成，同时减少了炎症细胞的募集，这代表了一种新的有希望的治疗穿透性角膜移植术后移植物排斥的方法。

　　我们目前的研究结果可以得出以下四个结论：

　　1、尼达尼布是一种有效的三联血管激酶抑制剂，可抑制淋巴管生成和血管生成。

　　2、尼达尼布可防止 VEGF-C、PDGF-BB 和 bFGF 刺激的 HLEC 细胞增殖、迁移和管形成的增强作用。

　　3、尼达尼布的局部和全身应用均可抑制小鼠角膜缝合线诱导的血管生成和淋巴管生成。

　　4、尼达尼布抑制缝合的鼠角膜中的炎症细胞募集。

　　我们还提供了证据表明，除了减少血液和淋巴管生长外，尼达尼布（Nintedanib）还能够抑制 F4/80+细胞募集。F4/80+细胞包括巨噬细胞和树突细胞。因此，据报道其他 TKI，如 PTK787/ZK222584、ZK261991 和舒尼替尼，在角膜新生血管形成模型中显示出类似的炎症细胞募集抑制作用。这一发现有多种可能的解释。一、减F4/80+细胞浸润可能是由于尼达尼布对 VEGF-A/VEGFR-1 通路的抑制所致。浸润性巨噬细胞是前淋巴/血管生成因子（例如 VEGF-A、VEGF-C 和 VEGF-D）的主要来源，可导致免疫扩增。除了对炎症细胞募集的影响外，尼达尼布还可能消除巨噬细胞分泌的这些前淋巴/血管生成因子的影响。此外，尼达尼布还有效抑制 Lck，这是 T 细胞受体的下游靶标，这可能会减少有效 T 细胞产生的巨噬细胞募集趋化因子。

　　总之，尼达尼布（Nintedanib）是一种新型强效三联血管激酶抑制剂，除了具有抗血管生成特性外，还显示出在体外和体内抑制淋巴管生成。尼达尼布在体外抑制由生长因子（包括 VEGF-C、bFGF 和 PDGF-BB）刺激的淋巴管生成。局部或全身应用，它有效缓解缝合线诱导的角膜血管生成和淋巴管生成，同时减少炎症细胞的募集，从而代表了一种新的有希望的治疗穿透性角膜移植术后移植物排斥的方法。微信扫描下方二维码了解更多：