多吉美/索拉非尼在肝癌中的活性

　　使用小分子多激酶抑制剂多吉美索拉非尼对晚期肝细胞癌 (HCC) 进行全身治疗与较大的个体间药代动力学变异性和不可预测的副作用有关，可能需要减少剂量或终止治疗。有机阳离子转运蛋白 OCT1（基因SLC22A1）已被提议作为 HCC 反应的临床生物标志物。由于缺乏 OCT1 转运索拉非尼的证据，我们使用组合方法来定义 OCT1 如何促进索拉非尼转运。非洲爪蟾中功能性OCT1蛋白的过表达卵母细胞和哺乳动物细胞系不促进索拉非尼转运。否则，尽管 OCT1 mRNA 和蛋白质水平可忽略不计，但索拉非尼在肝癌细胞系中大量积累。索拉非尼的药代动力学与小鼠的 OCT1 基因型无关。最后，癌症基因组图谱 HCC 队列中的 DNA 甲基化显着降低了SLC22A1mRNA 表达。这些结果清楚地表明 OCT1 非依赖性细胞索拉非尼摄取表明 OCT1 显然不是 HCC 中索拉非尼反应的有效生物标志物。

　　肝细胞癌 (HCC) 是癌症相关死亡的第三大原因，每年有超过半百万人被诊断出患有 HCC。早期 HCC 可以通过手术切除或肝移植治愈，而晚期或进展期 HCC 仍然有害。在美国，索拉非尼 (Nexavar) 仍然是唯一获得美国食品和药物管理局 (FDA) 批准用于晚期 HCC 一线治疗的小分子药物，尽管其治疗益处不大。索拉非尼是一种多激酶抑制剂，靶向 Raf/Ras 通路、VEGFR1、2 和 3 以及 PDGFRβ。由于这种双重功能，它通过减少肿瘤血管生成和信号传导以及增加肿瘤细胞凋亡来抑制肿瘤细胞增殖和生长。在 2007 年首次获得 FDA 批准后，多吉美索拉非尼随后被批准用于治疗晚期甲状腺癌和肾细胞癌，并在急性髓性白血病和卵巢癌中显示出活性。然而，与其他激酶抑制剂一样，索拉非尼受到个体间药代动力学差异较大、治疗窗口相对较窄以及出现需要减少剂量甚至停止治疗的使人衰弱的副作用的影响。已为索拉非尼建立暴露-毒性关系尽管索拉非尼的代谢途径已被很好地理解并且涉及 I 期和 II 期代谢物的形成，但其巨大的个体间药代动力学变异性的主要原因仍然未知。

　　我们之前报道过某些多吉美索拉非尼代谢物的细胞摄取受有机阴离子转运多肽 1B (OATP1B) 型转运蛋白的调节，并且它们的流出可由 ATP 结合盒 (ABC) 转运蛋白如 ABCC2 和 ABCC3 介导。然而，细胞摄取索拉非尼本身的主要机制仍不确定。最近的研究表明 (i) 转染了功能降低或丧失的有机阳离子转运蛋白 1 (OCT1) 变体的肝细胞癌细胞对索拉非尼介导的细胞毒性可能不太敏感，(ii) 索拉非尼的细胞积累可能在中国仓鼠卵巢增大（CHO）细胞过度OCT1，(iii) 索拉非尼是已知 OCT1 底物转运的不良抑制剂。基于这些观察，OCT1，一种在肝细胞基底外侧膜上高度表达的有机阳离子转运蛋白，已被提议作为 HCC 治疗中索拉非尼反应的生物标志物，尽管缺乏证据表明 OCT1 确实转运索拉非尼。这些知识对于评估 OCT1 作为有效生物标志物至关重要。例如，我们之前可以证明伊马替尼不是 OCT1 底物，因此质疑 OCT1 作为伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病 (CML) 的临床相关反应生物标志物。因此，为了解决 OCT1 是否转运索拉非尼的关键问题，我们使用各种体外和体内模型系统严格重新检查了索拉非尼的转运。综合这些互补研究的结果，我们得出结论，索拉非尼的细胞摄取与 OCT1 无关。

　　该研究还表明，多吉美索拉非尼的细胞内摄取可能与有机阴离子转运多肽有关，因为药物摄取，而不是非特异性膜结合，进入 HepG2 和 Huh7 细胞对环孢菌素 A 敏感。这种化合物是已知的几种已知的有机阴离子转运多肽的抑制剂，包括 OATP1B1、OATP1B3 和 OATP2B1,并且在这些摄取转运蛋白中，OATP2B1 在 HepG2和 Huh7细胞中功能性表达。然而，我们没有检测到 HEK-VC 细胞或过表达 mOATP2B1 或 hOATP2B1 的 HEK 细胞对索拉非尼的不同摄取，也没有检测到小鼠中 OATP2B1 缺乏对索拉非尼药代动力学的影响指示在HepG2和Huh7细胞其它转运蛋白，其可通过环孢菌素A在HepG2细胞来抑制这些可能是OATP1B1的介入或OATP1B3在Huh7细胞中，这两者都还在肝细胞中表达。虽然OATP1B1和OATP1B3的索拉非尼的摄取的作用是不完全的定义，两者都肯定参与索拉非尼葡糖苷酸的肝细胞摄取。

　　该研究表明，多吉美索拉非尼不是 OCT1 的转运底物，而且这种转运蛋白本身不太可能对索拉非尼在 HCC 中的处置和活性谱做出贡献。需要进一步研究以确定其他未知转运蛋白对索拉非尼的药代动力学和药效学的贡献。微信扫描下方二维码了解更多：