来那替尼(neratinib)克服了HER2扩增乳腺癌中的曲妥珠单耐药性

　　曲妥珠单抗已被证明可以改善 HER2 阳性乳腺癌患者的生存结果。然而，很大一部分 HER2 阳性患者要么对曲妥珠单抗具有固有耐药性，要么对曲妥珠单抗产生耐药性。我们评估了奈拉替尼（neratinib）（一种不可逆的 panHER 抑制剂）在一组 36 个乳腺癌细胞系中的作用。我们进一步评估了它在有或没有曲妥珠单抗的情况下在几种敏感和耐药的乳腺癌细胞以及 BT474 异种移植模型中的作用。我们证实，奈拉替尼在 HER2 扩增细胞系中的活性明显高于 HER2 非扩增细胞系。奈拉替尼降低了 4 种 HER 受体的激活并抑制了下游通路。然而，HER3 和 Akt 在 24 小时内重新激活，而曲妥珠单抗和奈拉替尼的组合可以防止这种情况。

　　奈拉替尼还降低了获得性曲妥珠单抗耐药细胞中的 pHER2 和 pHER3。在 4 个 HER2 阳性细胞系中，奈拉替尼与曲妥珠单抗联合使用比单独使用任一药物具有更大的生长抑制作用。此外，曲妥珠单抗与奈拉替尼的组合在 SKBR3 和 BT474 细胞中具有生长抑制作用，这些细胞对曲妥珠单抗以及 BT474 异种移植模型具有抗性。固有的曲妥珠单抗耐药细胞系对奈拉替尼表现出敏感性，但与单独使用奈拉替尼相比，该组合并未增强反应。HER2 和磷酸化 HER2 的水平显示与对奈拉替尼的敏感性直接相关。我们的数据表明，奈拉替尼是一种有效的抗 HER2 疗法，可以抵消 HER2 阳性乳腺癌的先天性和获得性曲妥珠单抗耐药性。

　　HER2 是人类表皮生长因子受体 (HER) 家族的成员，该家族还包括 EGFR (HER1)、HER3 和 HER4。HER 蛋白是受体酪氨酸激酶，由细胞外结构域、α-螺旋跨膜区和细胞内酪氨酸激酶结构域组成。HER2 的晶体结构显示细胞外结构域组成性地处于“开放”构象，准备进行二聚化。尽管 HER2 没有已知的配体，但它是其他 HER 受体的首选异二聚化伙伴，并参与其他 HER 家族受体之间的信号横向传输。就相互作用强度、配体诱导的酪氨酸磷酸化和下游信号传导而言，HER2/HER3 二聚体被认为是最有效的。HER2 信号通过 RAS-ERK 通路促进细胞增殖，并通过 PI3K-Akt-mTOR 通路抑制细胞死亡。大约 20% 的乳腺癌中会出现 HER2 的过度表达，并且与预后不良有关。

　　我们的结果表明，在敏感和获得性耐药 HER2 过表达 SKBR3 和 BT474 乳腺癌细胞中，曲妥珠单抗和奈拉替尼（neratinib）的组合在降低细胞活力方面比单独使用曲妥珠单抗更有效。在未使用曲妥珠单抗的 SKBR3 和 BT474 细胞中，奈拉替尼急性治疗抑制了 EGFR、HER2、HER3 和 HER4 以及下游途径 ERK 和 Akt 的磷酸化，反映了其对所有 HER 受体的酪氨酸激酶活性的直接抑制作用。相比之下，曲妥珠单抗并没有降低 EGFR、HER2、HER4 和 ERK 的磷酸化，反映了药物的不同作用机制。异种移植实验还表明，联合治疗导致 pAkt 和 pERK 活化降低，pHER2 降低最大，在异种移植模型中，与单一药剂相比，与更高的功效相关。尽管先前已证明曲妥珠单抗可下调 HER2，在我们的异种移植研究中，曲妥珠单抗、奈拉替尼或联合治疗均未观察到这种效果。这可能是因为异种移植肿瘤区域之间 HER2 染色存在显着异质性，本研究中使用的曲妥珠单抗剂量低于先前报道的异种移植实验，这可能会影响 HER2 下调量和评估。

　　临床上，对不再有反应的患者停止曲妥珠单抗治疗存在争议，部分原因是继续曲妥珠单抗治疗的费用。我们的数据显示，与继续曲妥珠单抗治疗相比，从曲妥珠单抗耐药细胞系中停用曲妥珠单抗导致细胞计数显着增加。此外，即使在存在曲妥珠单抗耐药性的情况下，曲妥珠单抗和奈拉替尼的组合也比单独奈拉替尼更有效。最近的数据支持这一点，该数据表明，尽管先前基于曲妥珠单抗的治疗出现疾病进展，但与单独使用拉帕替尼相比，拉帕替尼联合曲妥珠单抗可显着提高总生存期和无进展生存期。

　　奈拉替尼在多项临床试验中显示出有希望的活性，特别是在 HER2 阳性乳腺癌患者中。奈拉替尼和曲妥珠单抗联合紫杉醇化疗在接受过抗 HER2 药物和化疗的大量预治疗的患者中显示出临床益处，平均 4 个既往方案。目前正在进行一项关于奈拉替尼联合每周紫杉醇联合或不联合曲妥珠单抗、随后联合阿霉素和环磷酰胺 (AC) 作为 HER2 阳性局部晚期乳腺癌 (NSABP FB-7) 女性新辅助治疗的 II 期多中心随机研究。除奈拉替尼外，其他不可逆 TKI 包括达克替尼 (PF-00299804) 和阿法替尼 (BIBW2992) 也在临床试验中进行测试。阿法替尼单药治疗在经广泛预处理的 HER2 阳性乳腺癌患者中显示出有希望的临床活性，这些患者在曲妥珠单抗治疗后出现进展。

　　像拉帕替尼，奈拉替尼（neratinib）可以克服获得性曲妥珠单抗耐药细胞系模型中的曲妥珠单抗耐药，并可以增强曲妥珠单抗敏感细胞系对曲妥珠单抗的反应。然而，奈拉替尼还在一些对拉帕替尼具有先天耐药性的细胞系中显示出活性，这表明奈拉替尼可能对曲妥珠单抗和/或拉帕替尼无反应的患者具有临床益处。面临的挑战将是确定预测标志物，以选择那些可能受益于奈拉替尼治疗但无法受益于曲妥珠单抗或拉帕替尼的 HER2 阳性乳腺癌患者。这项研究的结果为奈拉替尼联合曲妥珠单抗和单独奈拉替尼（联合化疗）在接受曲妥珠单抗和/或拉帕替尼治疗后疾病进展的患者中进行临床试验提供了依据。微信扫描下方二维码了解更多：