一线奥希替尼9291耐药的可能机制

　　奥希替尼9291是一种突变特异性第三代 EGFR TKI，正在成为EGFR突变肺癌的首选一线疗法，但患者不可避免地会产生耐药性。我们在EGFRL858R诱导的肺腺癌的转基因小鼠模型中模拟了对奥希替尼的获得性耐药性，发现它主要通过EGFR 的继发性突变介导– C797S 或 L718V/Q。对患者循环游离 DNA 数据的分析表明，L718Q/V 突变几乎总是发生在 L858R 驱动突变的背景下。在小鼠中进行的治疗测试表明，厄洛替尼和阿法替尼都能导致对奥希替尼耐药的 C797S 肿瘤消退，而只有阿法替尼对 L718Q 突变肿瘤有效。一线奥希替尼联合厄洛替尼治疗阻止了EGFR继发突变的出现。这些发现强调了解耐药突变的具体特征对于确定潜在的后续治疗方法很重要，并提出了克服或预防体内奥希替尼耐药的策略。

　　奥希替尼在一线药物中也显示出有希望的活性，导致其最近被批准用于这种情况。这提出了关于一线奥希替尼耐药的可能机制的重要问题，对此知之甚少。对一线奥希替尼治疗出现进展的患者的循环肿瘤 DNA (ctDNA) 进行分析表明，MET扩增是最常见的耐药机制 (14%)，其次是 C797S (7%) 和 L718Q表皮生长因子受体突变（2% 的病例）。鉴于这些有限的信息，尚不清楚哪些治疗策略可能有效克服对一线奥希替尼的耐药性。一种可能的策略是依次应用或组合不同代的 EGFR TKI。一些研究表明，1日代TKI有效地与C797S，这是由几个病人谁回答治疗有1例报告的支持ST代EGFR TKI奥希替尼9291的或组合加上1第一代EGFR TKI在对 C797S 介导的奥希替尼产生耐药性后。事实上，目前正在进行一项临床试验，以评估奥希替尼和吉非替尼在 TKI 初治EGFR突变肺癌患者中的组合。同样，几个体外研究和一个病例报告表明，2第二代的TKI可以有效地已经通过采集一个L718突变（所获取奥希替尼9291抗性细胞）。

　　一线奥希替尼的平均无进展生存期为 19 个月，总生存期为 39 个月，优于其他 TKI 观察到的结果。然而，患者并未治愈，需要更好地了解对奥希替尼的获得性耐药性。在这里，使用EGFR突变体 LUAD 的 GEMM，我们表明对一线奥希替尼的耐药性可能是由于EGFR 中的获得性 C797S、L718Q 和 L718V 突变。这是获得EGFR的体内一线奥希替尼耐药模型的首次报道突变。来自一线奥希替尼 FLAURA 试验的数据表明，在获得性耐药时，在 7% 和 2% 的 ctDNA 病例中检测到 C797S 和 L718Q 突变。与我们的小鼠模型中 C797S 和 L718Q 突变的更均等分布相比，在这些患者样本（具有多种驱动突变）中观察到的 C797S 突变与 L718Q 突变的更高频率可能反映了耐药突变的等位基因特异性。事实上，我们对来自EGFR突变肺癌患者的 cfDNA 的分析清楚地表明，C797S 突变在 Del19 肿瘤亚组中占主导地位，并且 L718Q 和 L718V 突变通常仅出现在 L858R 的背景下，与 L718Q/ V 突变。为什么在患者的 L858R 突变的背景下更容易发现 L718Q/V 突变仍有待确定。这可能是由于不同突变组合的不同稳定性或其他生化特性的差异，例如它们的激酶活性或二聚化特性。有趣的是，我们的研究和其他人中的体外数据表明，携带 L718Q/V 突变的 Del19 细胞可以存在并且对奥希替尼耐药，这表明体内自发出现的耐药机制可能与观察到的有些不同。体外.

　　C797S 取代导致奥希替尼耐药的机制很简单，因为它去除了与奥希替尼共价反应的侧链硫醇。使用基于分子动力学的能量最小化获得的模型提供了一些关于 L718V/Q 突变如何影响药物结合的见解。L718 侧链在奥希替尼结合的野生型 EGFR TKD (PDB ID 4ZAU) 晶体结构中与药物的苯环接触。因此，正如其他人所指出的那样，用 V 或 Q 取代 L718 极有可能改变奥希替尼结合的模式或方向。我们通过对 L858R 突变的 EGFR TKD 与奥希替尼、厄洛替尼和阿法替尼的非共价复合物进行建模来证实这一点。虽然奥希替尼在能量最小化的 L858R TKD 复合物（亮氨酸位于 718 位）中的姿态保持不变，但对于 L718V 突变观察到范德华相互作用的丧失，并且观察到与谷氨酰胺侧链的空间冲突L718Q 突变。这些影响在模型中通过在药物结合位点重新定向 osimertinib 得到补偿，这可能使其定向不适合与 C797 的共价反应 - 正如之前对 L718Q/T790M EGFR 的争论。

　　奥希替尼结合能也有一些降低，表明共价反应前“遭遇复合物”的亲和力可能会降低——这也会降低疗效。预计相同的突变对厄洛替尼的结合能和方向具有相似的影响。在这种情况下，缺乏任何共价方面表明观察到的阻力一定是由于结合减弱引起的。事实上，L718 在 EGFR/厄洛替尼晶体结构中直接接触厄洛替尼。最后，L718V/Q 突变对阿法替尼结合能的影响仅为奥希替尼计算结果的约 80%，表明它们对阿法替尼共价反应的停留时间的影响较小。此外，阿法替尼的方向似乎受突变的影响较小——尽管在 L718V 变体中失去了与 L718 的相互作用，但其 L858R 结合方向的阿法替尼与 Q718 侧链之间没有冲突。微信扫描下方二维码了解更多：