劳拉替尼(Lorlatinib)可减少肝脏转移性生长

　　目前，PDAC 患者的最佳治疗选择是手术切除胰腺肿瘤。不幸的是，当 PDAC 患者被诊断出来时，大多数（~80%）存在不可切除的肿瘤或转移性疾病。此外，与所有其他复发模式（即，局部或肺部）的患者相比，手术切除并伴有远处肝脏复发的患者的中位无复发生存期显着降低。为了评估劳拉替尼（Lorlatinib）是否可以抑制肝脏中 PDAC 转移性病变的生长，我们使用了一个实验性肝转移模型。我们将 KPC mT4 细胞注射到健康同源小鼠的脾脏中。在这个模型中，肿瘤细胞通过门静脉循环直接从脾脏排入肝脏，并产生仅限于肝脏的转移灶。我们在脾内注射后 7 天开始使用劳拉替尼治疗，并继续每日治疗 14 天，然后分析转移灶。

　　我们发现，与载体治疗的小鼠相比，劳拉替尼治疗的小鼠的肝脏重量相对于体重降低。我们进一步量化了肝脏中转移病灶的大小和数量，发现劳拉替尼治疗的小鼠肝脏中的转移病灶大小显着减少，但没有显着减少。这导致劳拉替尼治疗的小鼠的转移负担显着减少。与原位模型的结果相似，我们通过 IHC 评估了增殖和细胞凋亡，并观察到劳拉替尼治疗小鼠肝转移灶中增殖细胞的减少。但与载体处理的小鼠相比，细胞凋亡没有差异。这些结果表明，类似于原位模型，劳拉替尼抑制肝脏转移性病变的生长。为了评估劳拉替尼处理的转移灶中免疫细胞的组成，我们制备了单细胞悬液并进行了流式细胞术分析。

　　我们没有检测到肿瘤中 CD45+免疫细胞中F4/80+巨噬细胞、Ly6C+单核细胞、B220+B 细胞、Nk1.1+NK 细胞、CD4+或 CD8+T 细胞的百分比有任何差异。相比之下，我们在劳拉替尼治疗的小鼠中检测到 Ly6G+中性粒细胞显着减少。我们通过肿瘤切片的免疫荧光染色证实，劳拉替尼治疗减少了肝转移灶中的中性粒细胞数量。胰腺癌的转移性病变的特点是类似于原发肿瘤部位的 ECM 过度沉积。类似地，我们发现劳拉替尼治疗小鼠的转移性病变显着降低了纤维化水平，与载体治疗小鼠的转移性病变相比，胶原沉积减少和 αSMA+细胞数量减少。为了证实中性粒细胞流入减少、纤维化和成纤维细胞积聚不仅仅是由于劳拉替尼治疗的小鼠中存在较小的转移，我们通过 IHC 染色分析了大小匹配的病变。我们发现，在用劳拉替尼治疗的小鼠中，大小匹配转移灶中的中性粒细胞和成纤维细胞积聚均减少，而纤维化的减少不显着。

　　综上所述，这些结果表明，劳拉替尼（Lorlatinib）通过抑制肿瘤相关中性粒细胞和癌症相关成纤维细胞 (CAF) 来抑制原发肿瘤部位和继发部位的 PDAC 肿瘤生长，后者可能是抑制 PDAC 的间接作用。中性粒细胞。

　　虽然我们不能排除对肿瘤细胞的直接影响，但我们的结果表明劳拉替尼的主要影响是对 TME 细胞的影响。因此，我们假设劳拉替尼治疗将适用于具有异质性 TME 组成的其他癌症类型。鉴于肝脏是结直肠癌 (CRC) 等其他胃肠道癌症的常见转移部位，我们确定劳拉替尼治疗是否也能抑制 CRC 细胞的转移进展。为了测试这一点，我们从来自villinCreERApcfl/flKrasG12D/+Trp53fl/R172HTgfbrIfl/fl(AKPT) 小鼠的小结直肠肿瘤衍生类器官制备单细胞悬液并将它们直接注射到健康同基因小鼠的脾脏中。我们在脾内注射后 9 天开始使用劳拉替尼治疗，并在 20 天内每天进行治疗，之后我们通过 IHC 分析转移负担。我们发现，与载体治疗的小鼠相比，劳拉替尼治疗的小鼠的肝脏重量相对于体重降低。我们进一步量化了肝脏转移病灶的数量和大小，发现劳拉替尼治疗的小鼠肝脏中转移病灶的大小显着减小，而转移病灶的数量没有显着差异。我们还通过 IHC 评估了增殖和细胞凋亡，并观察到与我们之前的模型相似的结果。

　　综上所述，这些结果表明劳拉替尼会影响转移性 CRC 病变的生长。与我们的 PDAC 转移模型的结果相似，我们发现劳拉替尼治疗的小鼠的 CRC 转移性病变中性粒细胞数量减少。最后，我们发现劳拉替尼治疗小鼠的 CRC 转移性病变中纤维化水平降低，与载体治疗小鼠的转移性病变相比，胶原沉积减少和 αSMA+成纤维细胞数量减少。总之，这些结果表明，劳拉替尼通过调节中性粒细胞和 TME 抑制不同肿瘤类型中原发部位和继发部位的肿瘤生长。微信扫描下方二维码了解更多：