他达拉非Tadalafil在体内对急性心肌梗死的心脏保护作用

　　他达拉非（Tadalafil）在体内对急性心肌梗死（AMI）的心脏保护作用，AMI大鼠分成3组（Ñ= 16 /组）接受70的多个心肌内注射μ单一的L- DMEM（对照）或用1.5×10个6个细胞单独未处理（MSCSç）或他达拉非处理的MSC（MSCSŤ）成梗塞和梗塞周围区域。来自每组（n= 8/组）的整个 LV 组织样本，在第 7 天收获用于 ELISA 和蛋白质印迹。在 2 周和 1 个月时对大鼠进行超声心动图评估（n= 8/组）。

　　A) AMI 大鼠被随机分配到四组 (n= 8/组) 并用 IP 注射 (体积 250μL) 治疗 5 天如下：盐水 (对照)、他达拉非 (5 mg/kg/天;半衰期，17.5 小时），NO 合酶抑制剂（L-NAME，150μg/kg）+ 他达拉非（5 毫克/千克/天）或 CXCR4 抑制剂（AMD3100，5 毫克/千克；半衰期，3.5 小时） + 他达拉非（5 毫克/公斤/天）。在他达拉非治疗前 2 小时开始 AMD3100 或 L-NAME 治疗。在 2 周和 1 个月时对大鼠进行超声心动图评估（n= 8/组）。

　　B) 用铯 (600 cGy × 2 次，总计 12000 cGy，Elite Gammacell 1000) 照射雌性大鼠进行骨髓消融。照射后一天，受体大鼠静脉注射（IV）来自供体雄性转基因大鼠BM的MSC（5×106），通过尾静脉表达绿色荧光蛋白（GFP）用于BM重建。清髓后 1 个月，大鼠进行 LAD 结扎，并随机分配到 4 组（n= 8/组）如下：± 5 每天 IP 与他达拉非和/或在 L-NAME 和 AMD3100 之前，然后安乐死在第 7 天评估 LV 提取物的 ELISA 和蛋白质印迹。

　　C) 对雌性小鼠进行 LAD 结扎。24小时后，AMI小鼠通过他达拉非的IP注射（20毫克/千克在250处理的μL，Ñ= 8）或生理盐水（对照组Ñ= 8）处理1个小时;然后 IV 注射表达 GFP，2 × 106的雄性供体小鼠 MSC，用 37 MBq111In-oxine（171 和 245 keV，111Inoxine 半衰期为 2.8 天；Nycomed Amersham）通过尾部。由于针孔准直器的尺寸，使用小鼠代替大鼠以获得足够高的空间分辨率 CT/SPECT 图像在辛辛那提放射科。在体外，标记效率[LE = 标记细胞计数/（标记细胞计数 + 上清计数）×100] 和细胞活力（台盼蓝试验）分别 > 95.2% 和 90%。对于闪烁显像，动物通过肌内注射氯胺酮（100 毫克/千克，Curamed）和咪达唑仑（2 毫克/千克，Hoffmann LaRoche）麻醉。联合 SPECT/CT 成像用于评估移植111 的命运在 2 小时、24 小时和 48 小时时对 ± 他达拉非有反应的 Inoxine 标记的 MSC。所有小鼠在 AMI 后第 7 天被安乐死，选定器官（心脏、肺、肾脏、肝脏和脾脏）的生物分布测定和特定的111In-oxine 活性（放射性衰变校正后每克组织的百万贝克勒尔，MBq /g 组织）在 ± 他达拉非治疗的小鼠中进行。此外，在两组的所有心脏中都进行了用于检测移植 GFP 细胞的离体荧光成像。

　　与 MSCsC相比，他达拉非在 MSCsT和 MSCsC 中增强了体外细胞培养的活力。在他达拉非处理的 MSCs 中，cGMP 活性以剂量依赖性方式增加（图 3）。1B)。他达拉非在 MSC 中增强了细胞信号传导（p-VASP、Erk1/2、PKG1、p-GSK3β和 p-STAT3）和抗凋亡分子（p-Akt 和 Bcl-xl 较高；Fas 表达较低）T与 MSCsC。SDF-1的浓度α，NO，iNOS的，AKT，CXCR4是在间充质干更高Ť对的MSCÇ。在用 L-NAME 预处理的MSCsT 中，NO、总 Akt 和 CXCR4 的水平降低，而 SDF-1α出乎意料地更高。此外，AMD3100 预处理的 MSCsT具有较低的 CXCR4 和 SDF-1α表达，但出乎意料地观察到更高水平的 iNOS、NO 和总 Akt。

　　更高的细胞存活率和较低的细胞死亡。在暴露于氧化应激 (100μmol/LH2O2) 的体外 MSCT培养物中观察到。与 MSCsC相比，MSCsT具有更高的 NOS 水平，但在用 L-NAME 抑制剂处理后，该表达被消除。他达拉非对 Fas 的调节受 PKG-MAPK 信号通路直接调节。MSCsT具有较高的 p-VASP、PKG1、Bcl-xl、p-Erk1/2 (Thr202/Tyr204) 和 p-STAT3 (Tyr705) 表达，但与 MSCsC相比，Fas 表达较低。然而，与 MSCsC相比，他达拉非的这些细胞保护作用在用 MAPK 或 PKG 抑制剂处理后在 MSCsT 中消失。此外，MSCsT 中的Fas 表达降低，并被 KT5823 和 U0126 抑制剂恢复。

　　与MSCsC相比，MSCsT中凋亡细胞（TUNEL+细胞）的数量显着减少。然而，他达拉非的这些细胞保护作用被 MAPK 或 PKG 抑制剂消除了。与 MSCsC相比，MSCsT 中的细胞存活率显着增加。类似地，MAPK 和 PKG 抑制剂降低了用他达拉非处理过的细胞中的细胞存活率。现在他达拉非的价格是多少？更多详情可咨询下方微信。